Clonacion

Páginas: 5 (1151 palabras) Publicado: 9 de abril de 2014
Indique el proceso de clonación molecular
Pasos que se llevan a cabo en la clonación de una secuencia de ADN:
Fragmentación: Inicialmente, el ADN de interés necesita ser fragmentado para proveer un segmento relevante de ADN de un buen tamaño. Unas enzimas llamadas endonucleasas específicas de secuencia hacen las veces de tijeras moleculares.
Ligación: Un procedimiento de ligación se empleacuando el fragmento de interés se inserta en un vector, que es una molécula de ADN capaz de replicarse en una célula y servir como vehículo para transferir a esa célula el ADN que se le ha insertado. Una enzima llamada ligasa une dicho vector y el ADN que se desea clonar. 
Transfección: Después de la ligación, el vector con el gen de interés se transfecta a una célula huésped que proporciona lamaquinaria enzimática necesaria para la replicación.. 
Selección: Finalmente, las células transfectadas se cultivan. Como este procedimiento actualmente se considera de baja eficiencia, se deben identificar las colonias de células que han sido exitosamente transfectadas con el vector que contiene el gen deseado. 
Los vectores de la clonación moderna incluyen marcadores de resistencia antibiótica,los cuales les permiten crecer sólo a las células en las que el vector ha sido transfectado. Además, los vectores de clonación pueden contener marcadores de selección coloridos que proveen una visión azul/blanca
Cuáles son las características que debe tener un vehículo para clonación molecular?

Indique cuales son los ingredientes que se necesitan para hacer una amplificación mediante PCROligonucleotidos
Uno debe tener la misma secuencia del ADN
Segundo debe de ser complementario a esa secuencia
Forward y reverse
Que son las BPVC?
Indique y explique tres tipos de vacunas
Vacunas inactivadas
Se producen haciendo crecer a las bacterias o a los virus en los medios de cultivo adecuados, y posteriormente se inactivan con calor y/o sustancias químicas (por lo general formalina). Enel caso de vacunas fraccionarias, el organismo se somete a un tratamiento adicional para purificar únicamente aquellos componentes que se incluirán en la vacuna (como, polisacárido de cápsula de neumococo).
Vacunas recombinantes
Los antígenos constituyentes de una vacuna también se pueden obtener por medio de ingeniería genética. A los productos obtenidos por este método algunas veces se lesdenomina vacunas recombinantes. Actualmente hay dos vacunas obtenidas por ingeniería genética: la vacuna contra la hepatitis B que se obtiene mediante la inserción de un plásmido que contiene el gen S del antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (HBsAg) en el hongo Saccaromyces cereviceae, el cual se encarga de producir el antígeno de superficie del virus mencionado; y la vacuna vivade Salmonella typhi (Ty21a) que contiene bacterias vivas modificadas genéticamente (en la síntesis del lipopolisacárido); esta modificación evita que dicha bacteria cause la enfermedad.
Vacunas vivas atenuadas
Se derivan de virus o bacterias “silvestres” o patógenas. Estos microorganismos se atenúan o debilitan en un laboratorio, generalmente por cultivos repetitivos. Por ejemplo, la vacuna desarampión que se usa en la actualidad se aisló de un niño con sarampión en 1954. Se requirió casi de diez años de pasos repetitivos en cultivo de tejidos para transformar al virus silvestre en un virus atenuado, utilizable en la elaboración de la vacuna del sarampión.
Que es la farmacogenia?
Que ocurre en el termociclador durante la amplificación del ADN?
Calienta o enfría los tubos a tres temperaturasdistintas (ciclos de reacción)
95 grados (desnaturalización)
40-60 grados (alineación) : se forman y se rompen constantemente los puentes de H entre los oligonucleótidos y el ADN, uniones mas estables duraran mas tiempo, polimerasa se unira al fragmento de ADN de doble cadena 5 a3
72 grados (extensión): la polimerasa alcanza la máxima actividad y continúa la síntesis de fragmentos de...
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