Clonacion

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Clonación molecular
La clonación molecular se utiliza en una amplia variedad de experimentos biológicos y las aplicaciones prácticas van desde latoma de huellas dactilares a producción de proteínas a gran escala.
En la práctica, con el fin de amplificar cualquier secuencia en un organismo vivo, la secuencia a clonar tiene que estar vinculada aun origen de replicación; que es una secuencia de ADN.
Transfección
Se introduce la secuencia formada dentro de células.
Selección
* Se seleccionan las células que han sido transfectadas conéxito con el nuevo ADN.
* Se aísla el ADN de interés de un segmento de ADN de tamaño adecuado.
* Proceso de ligación: el fragmento amplificado se inserta en un vector de clonación.
* Elvector se linealiza y a continuación se incuban el fragmento de ADN de interés y el vector de clonación.
* Se produce la transfeccion dentro de las células, las células transfectadas son cultivadas.Este es un proceso determinante, ya que determina el éxito de la clonación.
* Se identifican las células transfectadas y las no transfectadas. Hay vectores de clonación modernos en los que solo lascélulas transfectadas crecen.
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Clonación celular
Clonar una célula consiste en formar un grupo de ellas a partir de una sola. En organismosunicelulares como bacterias y levaduras, este proceso es muy sencillo, y sólo requiere la inoculación de los productos adecuados.
Sin embargo, en organismos multicelulares, la clonación de las células esuna tarea difícil, ya que estas necesitan unas condiciones del medio muy específicas.
Una técnica útil de cultivo de tejidos utilizada para clonar distintos linajes de células es el uso de aros declonación (cilindros).
De acuerdo con esta técnica, una agrupación de células unicelulares que han sido expuestas a un agente muta génico o a un medicamento utilizado para propiciar la selección se...