CLONACION

CLONACIÓN

Fernando Piquer

Índice
1. Clonación………………………………………………2-9
1.1 Clonación molecular............................2
1.2 Clonación celular.................................3
1.3 Clonación de organismos de forma
natural………………………………………………4
1.4 Gemelación artificial………………………….4
1.5 Separación de blastóeros…………………..5
1.6 Clonación reproductiva………………………5
1.7 Clonación terapéutica………………………..6
1.8Clonación de sustitución…………………….7
1.9 Clonación de especies extintas……………7
1.10 Consideraciones éticas…………………....8-9
2. Bibliografía………………………………………………..10

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1. Clonación
1.1 Clonación molecular
La clonación molecular se utiliza en una amplia variedad de experimentos biológicos y
las aplicaciones prácticas van desde la toma de huellas dactilares a producción de
proteínas a gran escala.
En lapráctica, con el fin de amplificar cualquier secuencia en un organismo vivo, la
secuencia a clonar tiene que estar vinculada a un origen de replicación; que es una
secuencia de ADN.
Transfección
Se introduce la secuencia formada dentro de células.
Selección
Finalmente se seleccionan las células que han sido transfectadas con éxito con
el nuevo ADN.
Inicialmente, el ADN de interés necesita ser aisladode un segmento de ADN de
tamaño adecuado. Posteriormente, se da el proceso de ligación cuando el fragmento
amplificado se inserta en un vector de clonación: El vector se linealiza (ya que es
circular), usando enzimas de restricción y a continuación se incuban en condiciones
adecuadas el fragmento de ADN de interés y el vector con la enzima ADN ligasa.
Tras la ligación del vector con el inserto deinterés, se produce la transfección dentro
de las células, para ello las células transfectadas son cultivadas; este proceso, es el
proceso determinante, ya que es la parte en la que vemos si las células han sido
transfectadas exitosamente o no.
Tendremos que identificar por tanto las células transfectadas y las no transfectadas,
existen vectores de clonación modernos que incluyen marcadores deresistencia a los
antibióticos con los que sólo las células que han sido transfectadas pueden crecer. Hay
otros vectores de clonación que proporcionan color azul/ blanco cribado. De modo,
que la investigación de las colonias es necesaria para confirmar que la clonación se ha
realizado correctamente.

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1.2 Clonación celular
Clonar una célula consiste en formar un grupo de ellas a partir de unasola. En el caso
de organismos unicelulares como bacterias y levaduras, este proceso es muy sencillo, y
sólo requiere la inoculación de los productos adecuados.
Sin embargo, en el caso de cultivos de células en organismos multicelulares, la
clonación de las células es una tarea difícil, ya que estas células necesitan unas
condiciones del medio muy específicas.
Una técnica útil de cultivo de tejidosutilizada para clonar distintos linajes de células es
el uso de aros de clonación (cilindros).
De acuerdo con esta técnica, una agrupación de células unicelulares que han sido
expuestas a un agente mutagénico o a un medicamento utilizado para propiciar la
selección se ponen en una alta dilución para crear colonias aisladas; cada una
proviniendo de una sola célula potencialmente y clónicamentediferenciada.
En una primera etapa de crecimiento, cuando las colonias tienen sólo unas pocas
células; se sumergen aros estériles de poliestireno en grasa, y se ponen sobre una
colonia individual junto con una pequeña cantidad de tripsina.
Las células que se clonan, se recolectan dentro del aro y se llevan a un nuevo
contenedor para que continúe su crecimiento en forma natural.

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1.3 Clonación deorganismos de forma natural
La clonación de un organismo es crear un nuevo organismo con la misma información
genética proveniente de una célula existente. Es un método de reproducción asexual,
donde la fertilización no ocurre. En términos generales, sólo hay un progenitor
involucrado. Esta forma de reproducción es muy común en organismos como las
amebas y otros seres unicelulares, aunque la...