Cocaina Y Gases

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Jo u ARN lof C hr o mat og r ap hy A, 1 2 1 7 (2 0 1 0) 7 2 42 - 7 2 4 8
Contenido enumera disponible en
ScienceDirect
Journal of Chromatography A
Página de inicio Diario:
www.elsevier.com / locate / chroma
Análisis de cocaína y dos metabolitos en muestras de sangre seca por líquido
cromatografía con detección uorescencia: Un nuevo test para la cocaína y
el consumo dealcohol
Laura Mercolini
, Roberto Mandrioli
, Gilberto Gerra
, Maria Augusta Raggi
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Lab o ra to rio de P h m ar ac o-T ox ic ic ol og Al an ys al es, De pa r t tm en una de Ph rm ac ti eu c al i Sc en c es, Fa cu lt y de P acy ha rm, Al ma ter S M a tu d io r um - U ni ver s lo a de B ol o una gn,
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H eal th & D Hu hombreevel op hombres t B r un ch, U ni t ed i N a ON de fi ce el Dr u gs un ri d C yo, VI ES na, tr Au s ia
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Artículo de Información
abstracto
Un método original HPLC coupledto spectro uorimetricdetection es presentedforthe simultaneousanal-
Art i c i s h le tor y:
Rece i v ed 21 Ju l y 2 0 1 0
lisis de muestras de sangre seca (DBS) de cocaína y dos metabolitos importantes, a saber,benzoilecgonina (su
Rece iv ed INRE vi sed fo rm 8 S ep t emb er 2 0 10
metabolito principal) y cocaetileno (el metabolito activo formado en la presencia de etanol). El cro-
Acce p te d 1 0 Se p tie mb er 20 1 0
matographic análisis se llevó a cabo en una columna C8, usando un tampón de fase móvil containingphosphate
Av. ai la bl e onl ne i 1 9 Se p tie mb er 20 1 0
(PH 3,0) - acetonitrilo (85:15, v /v). Uorescencia analito nativo se monitorizó a 315 nm, mientras que emocionante
a 230 nm. Una muestra rápida y factible pre-tratamiento se llevó a cabo mediante extracción con disolvente, obteniendo
Keyw o s d:
buenos rendimientos de extracción (> 91%) los valores andsatisfactoryprecision (RSD 99,8%), 85% (w / w)
de agua / metanol (90:10, v / v). Los analitos fueron luego
ácido fosfórico yfosfato monobásico de potasio puro para
se eluyó con 1 ml de metanol. El eluato se secó bajo vac-
análisis (> 99%) se adquirieron de Sigma-Aldrich (Milán, Italia).
uum, se volvió a disolver con 100 L de fase móvil y se inyectó en
Se añadió trietilamina pura para análisis (> 99,5%) fue adquirido de Fluka
el sistema de HPLC.
(Buchs, Suiza). El agua ultrapura (18,2 cm M) se obtuvo
por medio deun aparato MilliQ de Millipore (Milford, EE.UU.).
2,4. Método de validación
Las soluciones estándar se obtuvieron por dilución de las soluciones madre
con la fase móvil. Las soluciones fueron estables durante al menos 2
2.4.1. Las curvas de calibración
meses cuando se almacenan a -20
C (según la evaluación de ensayos HPLC); stan-
Las alícuotas de 5 L de soluciones estándar del analito ensiete diferentes
soluciones estándar se prepararon fresco todos los días.
concentraciones, que contienen el ES a una concentración constante, fueron
añadido a 10 - DBS L, prestando atención de no tocar la superficie de la tarjeta
con la punta de la pipeta o ir fuera de la mancha de sangre roja. Un volumen
2,2. Instrumentación HPLC y condiciones
de 20 soluciones de analito Lof estándar en sietediferentes concentraciones
ciones, que contienen el SE a una concentración constante, se añadió a
El sistema cromatográfico se compone de un Jasco (Tokio,
400 L de plasma en blanco. La resultante DBS pinchos o muestras de plasma
Japón) PU-2089 PLUS bomba cromatográfica y un Jasco FP 2020-
se sometieron a la descrita anteriormente pre-tratamiento procedi-
detector de espectrometríauorimetric fijado en
= 230 nm,
= 315 nm.
exc
em
mientos y, finalmente, se inyecta en la HPLC. El procedimiento se llevó
Las separaciones se obtuvieron en un Varian (Walnut Creek, EE.UU.)
a cabo por triplicado para cada concentración. El analito / IS área del pico
Microsorb MV columna C8 (250 mm x 4,6 mm ID, 4 m) mantuvo
relaciones obtenidas (los números adimensionales) se representaron frente a...