Cocos (+)

COCOS (+)
CATALASA

(+) | (-) |
* Micrococcaceae: * Micrococcus. * Staphylococcus: * Aureus. * Stomatococcus. | * Streptococos: * Pyogenes * Pneumoniae * Enterococos |
Pruebas bioquímicas * Coagulasa * DNAsa * Manitol Salado * OFglucosa * Baird Parker | Pruebas bioquímicas * Hemólisis (Agar Sangre) * Bacitracina * PYR (Pirrolidonil Arilamidasa) *Bilis Esculina * NaCl 6,5% * Hidrólisis del Hipurato |

* OXIDACIÓN-FERMENTACIÓN GLUCOSA
Principio:
Permite determinar qué proceso realiza la bacteria para metabolizar los hidratos de carbono (en este caso glucosa):
* Fermentación: Proceso anaerobio, por lo común las bacterias que realizan este proceso son anaerobias facultativas aunque también podrían existir anaerobias estrictas.Existen tres vías metabólicas de la fermentación distintas, sin embargo todas tienen en común que requieren la fosforilación de la glucosa como paso inicial y una molécula orgánica como aceptor terminal de electrones.
* Oxidación: Proceso aerobio, en gral las bacterias que oxidan los HC son aerobias estrictas. No requiere fosforilación inicial y requiere oxígeno o un compuesto inorgánico comoaceptor terminal de electrones.
La fermentación produce mayor acidez que la oxidación.

Medio de cultivo.

Como esta prueba (OF de glucosa) tiene interés especial para diferenciar Staphylococcus (fermentadores) y Micrococcus (oxidadoras), tienen un medio especial. El Staph OF diseñado para esto por poseer sólo glucosa y manitol como hidratos de carbono. Tiene púrpura de bromocresol comoindicador de pH:
Ácido pH=5,2 | Básico pH=6,8 | Sin inocular |
Amarillo | Púrpura | Púrpura |

El tubo para determinar fermentación se debe sellar con vaselina líquida o Vaspar (estériles) para excluir todo el oxígeno y que la reacción se produzca en forma anaerobia.
Se incuba a 35ºC por 48hs o más tiempo

Existe un medio para bacilos gramnegativos (de Hugh y Leifson) que se le agregan mashidratos y tiene azul de bromotimol como indicador de pH (verde sin inocular)
La concentración de agar empleado (3 g/l) permite también la observación de la movilidad, además de la capacidad oxidativa o fermentativa de un microorganismo.

Resultados

Puesto que tanto la oxidación como la fermentación dan productos ácidos, el indicador virará en cualquier caso positivo hacia el amarillo. En un casonegativo, el medio quedaría del color sin inocular.

* COAGULASA

Principio

Probar la capacidad de un microorganismo de coagular el plasma por la acción de la enzima coagulasa. Se utiliza de manera específica para diferenciar especies dentro del género Staphylococcus. Un resultado positivo es característico de S.aureus subesp. aureus.
La coagulasa es una enzima con actividad semejantea la protrombina, capaz de transformar el fibrinógeno en fibrina, produciendo la formación de un coagulo visible.
Para que la prueba sea más específica para las especies Staphyilococcus, se le agrega heparina al plasma, que inhibe la coagulación por los microorganismos que utilizan citrato (que también producirían coagulo).
La coagulabilidad del plasma debe controlarse agregándole solución deCaCl2 (dil 1:2). Si el plasma está apto para su uso, debería producirse el coagulo.

Técnica
Se coloca el plasma de humano o de conejo en un tubo estéril y se añade el cultivo puro en caldo de 18-24hs. (rotar el tubo para homogeneizar, no sacudir)
Incubar en baño de agua a 37ºC por 4hs. Observar cada 30minutos.
Resultados
Positivo: Formación de coagulo o filamentos de fibrina separadosNegativo: Ausencia de formación de coagulo, la suspensión permanece igual que el tubo no inoculado.

* MANITOL SALADO

Principio

Debido a la alta concentración de sal permite solamente el crecimiento de microorganismos tolerantes a la misma (medio diferencial para género Staphylococcus). También se estudia la capacidad de algunas especies de utilizar el manitol con formación de ácido....