Colesterol Total
Procedimiento:
Metodología:
I. DETERMINACION DE COLESTEROL TOTAL
1. Fundamento:
Lipasa
Esteres de colesterol
Colesterol + ácidos grasos
Colesterol oxidasaColesterol + H₂O
Coleste - 3 – ona + H₂O
Peroxidasa
H₂O₂ + Fenol + 4-AF
Quinona coloreada + H₂O
Abreviaturas:
* POD = Peroxidasa
* 4-AF = 4-aminofenazona.
2. técnica:| BLANCO | STANDARD | MUESTRA |
STANDARD | ---- | 0.02 ml | ---- |
MUESTRA | ---- | ---- | 0.02 ml |
REACTIVO | 2 ml | 2 ml | 2 ml |
Mezclar los 3 tubos e incubar por 10’ a 37° c y leer a 505nm color estable por 30’.
3. Resultados:
[Standard] X
ABS muestra
C. T. (mg/dl) =
ABS standard
* 0,214
100 mg/dl X
C. T. (mg/dl) =
0,207
[Standard] = 200mg/dl.C. T. (mg/dl) = 103,38 mg/dl
4. Valores referenciales:
Deseable | ˂ 200 mg/ dl |
Moderadamente alto | 200 – 239 mg/dl |
Elevado | ≥ 240 mg/dl |
DETERMINACIÓN DEHDL
1. Fundamento:
a) Primero: Los HDL contenidos en el suero son separados selectivamente del resto de moléculas mediante un agregado de Sulfato de Dextran en presencia de Mg⁺⁺.
Elsobrenadante, obtenido luego de una centrifugación es el que presenta únicamente moléculas de HDL.
b) Segundo: Al añadir este sobrenadante se le somete a la misma técnica para determinación de colesteroltotal.
2. Técnica:
| BLANCO | STANDARD | MUESTRA |
SOBRENADANTE | ---- | ----- | 0.1 ml |
STANDARD | ---- | 0.02 ml | ----- |
REACTIVO | 2 ml | 2 ml | 2 ml |
Incubar a 15’ a37° c leer a 505 nm.
3. Resultados:
HDL (mg/dl) =
ABS muestra
[Standard] X
ABS standard
HDL (mg/dl) =
45,7 X
0,182
0,207
HDL (mg/dl) = 40,18 mg/dl
I. 40 - 60mg/dl.
Valores referenciales:
II. DETERMINACION DE TRIGLICERIDOS
5. Lipoproteína lipasa
Fundamento:
Triglicéridos
Glicerol + ácidos grasos
Glicerol Quinasa
Glicerol – 1 - P +...
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