Colesterol

C
SIGNIFICACION CLINICA La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad diagnóstica limitada. Sin embargo, su concentración varía de manera más o menos predecible en un gran número de condiciones clínicas. Se ha visto que el colesterol es uno de los factores contribuyentes a la formación de ateromas dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen en individuoshipercolesterolémicos. Diversos estudios epidemiológicos han permitido observar además, que el riesgo de contraer enfermedad cardíaca coronaria (ECC) para los individuos varones de más de 40 años con colesterolemia menor o igual a 2,10 g/l es 3 veces menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces menor que entre individuos con más de 2,60 g/l. FUNDAMENTOS DEL METODO La secuencia reaccional es lasiguiente: CHE ésteres del colesterol > colesterol + ácidos grasos CHOD colesterol + O2 > colesten-3-ona + H2O2 POD H2O2 + 4-AF + aceptor > quinonimina roja REACTIVOS PROVISTOS S. Standard: solución de colesterol 2 g/l. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO. A Reactivo A: viales con colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa (CHOD), peroxidasa (POD) y 4-aminofenazona (4-AF). B. Reactivo B:solución de buffer Good pH 6,8, conteniendo fenol y colato de sodio. Concentraciones finales CHE ........................................................................ ≥100 U/l CHOD .................................................................... ≥ 100 U/l POD .................................................................... ≥ 1000 U/l 4-AF................................................................... 0,2 mmol/l Good ........................................................ 50 mmol/l; pH 6,8 Fenol .................................................................... 15 mmol/l Colato de sodio .................................................. 0,2 mmol/l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivo de Trabajo: reconstituir el contenidode un vial de Reactivo A con una parte de Reactivo B. Transferir al frasco de Reactivo B, enjuagando varias veces el vial con el mismo. Mezclar hasta disolución completa. Homogeneizar y fechar.

Colestat
enzimático AA
Método enzimático para la determinación de colesterol en suero o plasma PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando lasprecauciones habituales de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable 60 días a partir delmomento de su preparación. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de deterioro de los reactivos. En tal caso desechar. MUESTRA Suero o plasma a) Recolección: se debe obtener de la manera usual. b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como anticoagulante para suobtención. c) Sustancias interferentes conocidas: - Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfieren en la determinación. - Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valores falsamente aumentados por lo que no deben ser usados. - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 80 mg/l, ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, ni hemólisis ligera.Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el colesterol en suero es estable por lo menos 1 semana en refrigerador y 2 meses en congelador, sin agregado de conservantes. MATERIAL REQUERIDO (no provisto) - Espectrofotómetro. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. - Tubos o cubetas...