Colestrol

COLESTEROL
FUNDAMENTO DEL MÉTODO
Tanto el colesterol libre como el esterificado presente en la muestra originan, según las reacciones acopladas descritas a continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria.
Col. esterasa
Colesterol esterificado + H2O Colesterol + Acido graso
Col. Oxidasa
Colesterol + ½ O2 + H2OColestenona + H2O2
Peroxidasa
2H2O2 + 4 – Aminoantipirina + Fenol Quinonaimina + 4 H2O

CONSERVACIÓN
Conservar a 2-8°C.
El Reactivo y el Patrón son estables hasta la fecha d caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.
Indicaciones de deterioro:
* Reactivo: Presencia departículas, turbidez, absorbancia del banco superior a 0,200 a 500 nm (cubeta de 1 cm).
* Patrón: Presencia de partículas o turbidez.
MUESTRAS
Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estándar.
El colesterol en suero o plasma es estable 7 días a 2-8°C. Pueden utilizarse como anticoagulantes la heparina, EDTA, oxalato de fluoruro.
PROCEDIMIENTO
1. Atemperar el reactivo a temperaturaambiente.
2. Pipetear en tubos de ensayo: (Nota 1)

| Blanco | Patrón | Muestra |
Patrón Colesterol (S)MuestraReactivo | ----1,0mL | 10 L--1,0mL | --10L1,0mL |

3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25°C) o durante 5 minutos a 37°C.
4. Leer la absorbancia (A) del Patrón y de la muestra a 500 nm frente al Blanco. El color es estable duranteal menos 2 horas.
CÁLCULOS
La concentración de colesterol en la muestra se calcula a partir de la siguiente formula general:
A MuestraA Patrón X C Patrón=C Muestra
Si se utiliza para calibrar el Patrón de Colesterol suministrado (Nota 2):
A MuestraA Patrón | X 200 = mg/dL colesterolX 5,18 = mmol/L colesterol |

VALORES DE REFERENCIA
Los siguientes valores discriminantes universales hansido establecidos por el US National Cholesterol Education Program y también aceptados en otros países para la evaluación del riesgo de enfermedad de las arterias coronarias.
Hasta 200 mg/dL = 5,2 mmol/L200-239 mg/dL = 5,2-6,21 mmol/L240 mg/dL = 6,24 mmol/L | OptimoModeradoElevado |

CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
* Limite de detección: 0,3 mg/dL = 0,008 mmol/L
* Limite de linealidad:1000mg/dL = 26 mmol/L. cuando se obtengan valores superiores, diluir la muestra ½ con agua destilada y repetir la medición.
* Sensibilidad analítica: 1,75 mAdL/mg = 67,6 mAL/mmol
* Interferencias: la hemoglobina (5 g/L) y la bilirrubina (10 mg/dL) interfieren. La lipemia (triglicéridos 10 d/L) no interfiere. Otros medicamentos y sustancia pueden interferir.

CARACTERISTICAS DIAGNOSTICASEl colesterol es un esteroide de alto peso molecular que contiene una estructura ciclopentanofenantreno. El colesterol de la dieta se absorbe parcialmente y también se sintetiza en el hígado y otros tejidos. El colesterol se trasporta en el plasma de las lipoproteínas. Se excreta a la bilis como tal o tras su trasformación en ácidos biliares.
Las concentraciones elevadas de colesterol se asociancon un riesgo progresivamente creciente de arteroesclerosis y enfermedad de las arterias coronarias.
El diagnostico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.
BIBLIOGRAFÍA
1. Allain CC, Poon LS, Chan CSG, Richmod W and Fu PC. Enzymatic determination of total serum colesterol. Clin Chem 1974; 20:470-475.
2. Meiattini F, prencipe L, Bardelli F, Giannini G and Tarli P. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone chromogenic system used in the enzymic determination of serum colesterol. Clin chem 1978; 24: 2161-2165.
3. National Cholesterol Education Program Expert Panel. Third report of de National colesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment...