coliformes totales

PRACTICA No

DETERMINACION DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES POR LA TÉCNICA DE NÚMERO MÁS PROBABLE

Se basa en la determinación de presencia o ausencias de un determinado tipo de m.o. (enfunción de que crezca, no de que produzcan determinada reacción en el medio), en cantidades de crecientes de muestra. La muestra de agua se procesa entre diluciones proporcionales seriadas sembradas en 9a 15 tubos del medio adecuado.

Dentro de este grupo podemos encontrar a los Coliformes, pertenecen a la familia Enterobacteriaceae(Escherichia, Enterobacter, Citrobacter y Klebsiella)Bacilos Gramnegativos, fermentan lactosa con producción de gas y ácido a 35 °C en 48 horas y Coliformes termo tolerantes, los cuales presentan la misma características que los Coliformes con la diferencia quefermentan lactosa formando ácido y gas a 44,5 ° C en 24 horas. (Escherichia y Klebsiella)
Para poder detectar estos microorganismos en aguas de contacto primario y secundario se puede realizar latécnica de recuento indirecto por tubos múltiples de fermentación expresado en el Número Más Probable (NMP), esta es una técnica presuntiva basada en probabilidades estadísticas, la cual busca determinar lapresencia de microorganismos indicadores como Coliformes y Coliformes termo tolerantes.
MATERIALES Y REACTIVOS
Pipetas de 10 mL, 1 mL, 0.1Ml o Micropipetas.
1 Gradilla
Agar Lauril Sulfato ( 9tubos )
Caldo Brilla y campanas de Durham..
Agar EC
3 tubos de agua peptonada( 9ml para cada tubo)
Muestra de agua

METODOLOGIA
Realizar diluciones seriadas dependiendo la naturaleza de lamuestra (Limpia, medio contaminada o residual)

1 ml (1000μL) para la primera dilución (10-1)
0,1ml (100μL) para la segunda dilución (10-2)
0.01ml (10μL) para la tercera dilución (10-3)

Preparar 9Tubos de Agar lauryl Sulfato e introducir una campana Durham a cada tubo.( medio de Pre enriquecimiento del microorganismo)
Realizar las diluciones correspondientes 10 -1 , , 10 -2, 10 -3, en...