Coliformes Totales
Páginas: 2 (271 palabras)
Publicado: 11 de noviembre de 2012
COLIFORMES TOTALES
Técnica de filtración sobre membrana
1. Desenvolver el filtro de la envoltura con la que se ha esterilizado.
2. Separar elembudo de la base del filtro.
3. Colocar la membrana filtrante de 0,45 µm de tamaño de poro sobre el portafiltros de las base del mismo.El manejo de lasmembranas se debe realizar con pinzas de punta plana o guantes de goma para no lesionarlas.
4. Colocar el embudo sobre la base, teniendo cuidado de nolesionar la membrana y que esta quede bien centrada. La membrana filtrante queda ahora situado entre el embudo y la base-soporte del filtro.
5. Filtrar 100 mLde la muestra de agua a través del filtro. Poner en marcha el sistema de vacio.
6. Una vez filtrada toda la muestra, parar el sistema de vacio y separar elembudo de la base del filtro.
7. Retirar con pinzas estériles o flameadas la membrana filtrante.
8. Colocar la membrana sobre la placa con laalmohadilla absorbente y el caldo Endo, de forma progresiva para evitar que queden burbujas entre la membrana y el medio y que quede asegurado el contacto entre lamembrana y el medio.
9. Colocar la tapa de la placa de Petri, invertir la placa e incubar en estufa a 37ºC durante 24 horas
En este medio todoslos coliformes crecen formando colonias de color rojo oscuro con el característico brillo metálico de Escherichia coli de color verde-azulado aunque en losgéneros Citrobacter, Klebsiella y Enterobacter no es tan intenso como en Escherichia y puede pasar desapercibido.
Los resultados se expresan en UFC/100 mL.
Técnica de filtración sobre membrana
1. Desenvolver el filtro de la envoltura con la que se ha esterilizado.
2. Separar elembudo de la base del filtro.
3. Colocar la membrana filtrante de 0,45 µm de tamaño de poro sobre el portafiltros de las base del mismo.El manejo de lasmembranas se debe realizar con pinzas de punta plana o guantes de goma para no lesionarlas.
4. Colocar el embudo sobre la base, teniendo cuidado de nolesionar la membrana y que esta quede bien centrada. La membrana filtrante queda ahora situado entre el embudo y la base-soporte del filtro.
5. Filtrar 100 mLde la muestra de agua a través del filtro. Poner en marcha el sistema de vacio.
6. Una vez filtrada toda la muestra, parar el sistema de vacio y separar elembudo de la base del filtro.
7. Retirar con pinzas estériles o flameadas la membrana filtrante.
8. Colocar la membrana sobre la placa con laalmohadilla absorbente y el caldo Endo, de forma progresiva para evitar que queden burbujas entre la membrana y el medio y que quede asegurado el contacto entre lamembrana y el medio.
9. Colocar la tapa de la placa de Petri, invertir la placa e incubar en estufa a 37ºC durante 24 horas
En este medio todoslos coliformes crecen formando colonias de color rojo oscuro con el característico brillo metálico de Escherichia coli de color verde-azulado aunque en losgéneros Citrobacter, Klebsiella y Enterobacter no es tan intenso como en Escherichia y puede pasar desapercibido.
Los resultados se expresan en UFC/100 mL.
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