Coloracion De Bacterias: Tincion De Gram
1. OBJETIVOS:
* Aprender una técnica de coloración diferencial.
* Interpretar los resultados obtenidos, distinguiendo bacterias Gram positivasy Gram negativas.
* Aprender a manejar el microscopio para la observación de bacterias y hongos.
2. FUNDAMENTO TEORICO:
La tinción diferencial requiere más de un tipo de colorante y seutiliza para distinguir entre varios tipos de células bacterianas. Una tinción diferencial típicamente consiste de tres pasos principales: primero un colorante primario, el cual se utiliza parateñir a todas las células en la tinción; enseguida un paso de decoloración, el cual remueve el colorante solo de ciertos tipos de células y finalmente un colorante de contraste, el cual tiñe las célulasrecién decoloradas pero no tiene efecto sobre las células que aún retienen el colorante primario.
La tinción de Gram, es una de las tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología, queclasifica los cultivos bacterianos en Gram positivas y Gram negativas. La reacción de la tinción de Gram se basa en la cantidad de Peptidoglicano que se encuentra en las paredes celulares de estasbacterias. Las bacterias Gram positivas tienen muchas capas de Peptidoglicano que contiene ácido teicoico. El ácido teicoico reacciona con el cristal violeta y el yodo utilizado en este proceso detinción. Como la pared celular de las células Gram positivas retiene estos compuestos, es más difícil decolorar una célula Gram positiva que una Gram negativa. Una mezcla de alcohol remueve el cristalvioleta de la célula Gram negativa, pero no de la Gram positiva.
Cuando otro colorante, usualmente safranina, se añade, las células Gram positivas siguen de color azul-violeta mientras que las Gramnegativas absorben el color rojizo de la safranina. Al final del procedimiento de tinción, las células Gram positivas serán del color del cristal violeta, o colorante primario, y las células Gram...
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