Coloración Papanicolau

Páginas: 5 (1024 palabras) Publicado: 15 de mayo de 2013
Coloración PAPANICOLAOU


Juego de soluciones para la coloración de citologías por el método de Papanicolaou

PRINCIPIO
La tinción de Papanicolaou es el método de tinción más utilizado para
material citológico. En el primer paso se tiñen los núcleos con una
solución de hematoxilina. Los núcleos aparecen azules a violeta. El
segundo paso es la tinción del citoplasma con una soluciónanaranjada,
que presenta especialmente las células maduras y queratinizadas. Las
estructuras diana se tiñen de anaranjado con diferentes intensidades. En
el tercer paso de tinción se usa la llamada solución polícroma, que es una
mezcla de eosina, verde luz SF y pardo de Bismarck. Con la solución
polícroma se muestra la diferenciación del epitelio escamoso simple.

MUESTRAS
Muestrasginecológicas, cada muestra (fondo, cervix y endocervix) se
extiende muy suavemente para evitar destrucción de estructuras. Los
extendidos no deben ser grumosos y deben cubrir, por lo menos, 1/3 parte
de la placa cada uno.
Se deben usar láminas nuevas y prelavadas con alcohol de 96% para
quitar la grasa.
Toda muestra biológica
potencialmente infecciosa.

debe

se

considerada

comoCONTENIDOS
PAPANICOLAOU HEMATOXILINA –Listo para su uso
Hematoxilina Certificada
Potasio y Alumino Sulfato 12-H R.A.
Mercurio II Oxido R.A.
Acido Acetico R.A.
Alcohol al 96%
Agua desmineralizada Tipo II

5g/l
100 g/l
2.5g/l
12 ml
50 ml
csp

PROCEDIMIENTO
1.
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20.
21.

PAPANICOLAOU NARANJA G –Listo para suuso
Anaranjado G Certificado
Acido Fosfotungstico al 0.015% Sol Alcoholica

5g/l
0.15g/l

PAPANICOLAOU SOLUCION EA-50 –Listo para su uso
Eosina Y certificada al 0.5%
Bismark Bronw certificado al 0.5%
Verde FCF amarillento cerfificado al 0.5%
Acido fosfotungstico al 0.2% Sol alcoholica

450 ml
100 ml
450 ml
100 ml

CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Las solucionesdeben almacenarse entre 15° y 30°C y protegidos
C
de la luz. Después de abierto el contenido almacenado entre 15°C y
30° y protegidos de la luz es estable hasta la fec ha de caducidad
C
indicada en la etiqueta.

La presencia de un ligero precipitado en los colorantes de
Hematoxilina y Naranja G, debido a los cambios de temperatura, no
altera su capacidad de tinción. Filtrar en caso necesario•
Temperaturas inferiores a 15° pueden precipitar c olorantes de las
C
soluciones colorantes.

Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.

22.

23.

10 pases (ni lentos ni rápidos) en el alcohol de 80 %.
10 pases en alcohol al 70 %.
10 pases en alcohol al 50 %.
10 pases en agua destilada.
Hematixilina de Harris por 3 minutos (tiempo variable).
Pases en agua destilada(hasta quitar el exceso de colorante).
6 pases en Hcl al 0.5 %.
Agua corriente por cinco min. (chorro lento).
10 pases en agua destilada.
10 pases en alcohol al 50 %.
10 pases en alcohol al 70 %.
10 pases en alcohol al 80 %.
10 pases en alcohol al 96 %.
Colocar en Naranja G por 1 ½ minutos (tiempo variable).
10 pases en alcohol al 96 %.
10 pases en alcohol al 96 %.
Colorear en EA-50 por 3min. (tiempo variable).
10 pases en alcohol al 96 %.
10 pases en alcohol al 96 %.
10 pases en alcohol al 96 %.
10 pases muy lentos en Isopropanol (dejar un rato para que se
deshidraten y después secar bien.
10 pases muy lentos y dejando un buen rato para que se
deshidraten bien, en la mezcla de Isopropanol-Xilol. (secar
bien gradilla)
Montar las laminas.

RESULTADO
Los núcleos setiñen en azul a violeta, mientras que el citoplasma muestra
varios tonos de azul, naranja, rosa o rojo asi:

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS

Observe la simbología en los rótulos de las soluciones.

Los colorantes EA, que contienen metanol, y el colorante OG 6, que
contiene etanol, son tóxicos por ingestión e inflamables. Manipular
con precaución.

Las soluciones usadas y las caducadas...
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