colorantes
Páginas: 3 (656 palabras)
Publicado: 8 de septiembre de 2015
PRÁCTICA Nº 14
SEPARACIÓN DE COLORANTES POR CROMATOGRAFÍA CLÁSICA EN COLUMNA
Fundamento
En esta práctica se pretende visualizar las dos características fundamentales de todo procesocromatográfico, como son la migración diferencial y el ensanchamiento de banda. Para ello procederemos a la separación mediante cromatografía líquida en columna de los componentes de una mezcla sencillacompuesta de dos colorantes, azul de metileno y anaranjado de metilo. Utilizaremos la modalidad de cromatografía de adsorción, empleando alúmina como adsorbente.
Dependiendo de la composición de la fasemóvil así será mayor o menor la retención de los analitos. Recordemos que en cromatografía de adsorción las fases móviles más fuertes (mayor poder de elución) son las más polares, mientras que losdisolventes apolares o poco polares son débiles (poco poder de elución). Así pues empleando etanol como fase móvil el azul de metileno es el único analito eluido mientras que el anaranjado de metilo esfuertemente retenido por la fase estacionaria. La elución de este último se lleva a cabo empleando una fase móvil fuerte como el agua.
El hecho de que los analitos sean coloreados nos va a permitir verel ensanchamiento de la banda cromatográfica conforme desciende a lo largo de la columna.
Finalmente, iremos recogiendo fracciones correspondientes a la elución del azul de metileno y mediremos suabsorbancia para después representarla frente al volumen de fase móvil. Obtendremos así el cromatograma con el pico del analito.
Reactivos y disoluciones necesarias
- Alúmina activada para uso encromatografía.
- Para la fase móvil:
Etanol.
Agua destilada.
- Disolución problema: Disolución de azul de metileno y anaranjado de metilo en etanol conteniendo aproximadamente 0.05 g/l decolorante.
Material e instrumentación necesarios
- Columna cromatográfica con tubo de látex y pinza de regulación de goteo.
- Lana de vidrio (sólo en el caso en el que la columna no incluya una base de...
SEPARACIÓN DE COLORANTES POR CROMATOGRAFÍA CLÁSICA EN COLUMNA
Fundamento
En esta práctica se pretende visualizar las dos características fundamentales de todo procesocromatográfico, como son la migración diferencial y el ensanchamiento de banda. Para ello procederemos a la separación mediante cromatografía líquida en columna de los componentes de una mezcla sencillacompuesta de dos colorantes, azul de metileno y anaranjado de metilo. Utilizaremos la modalidad de cromatografía de adsorción, empleando alúmina como adsorbente.
Dependiendo de la composición de la fasemóvil así será mayor o menor la retención de los analitos. Recordemos que en cromatografía de adsorción las fases móviles más fuertes (mayor poder de elución) son las más polares, mientras que losdisolventes apolares o poco polares son débiles (poco poder de elución). Así pues empleando etanol como fase móvil el azul de metileno es el único analito eluido mientras que el anaranjado de metilo esfuertemente retenido por la fase estacionaria. La elución de este último se lleva a cabo empleando una fase móvil fuerte como el agua.
El hecho de que los analitos sean coloreados nos va a permitir verel ensanchamiento de la banda cromatográfica conforme desciende a lo largo de la columna.
Finalmente, iremos recogiendo fracciones correspondientes a la elución del azul de metileno y mediremos suabsorbancia para después representarla frente al volumen de fase móvil. Obtendremos así el cromatograma con el pico del analito.
Reactivos y disoluciones necesarias
- Alúmina activada para uso encromatografía.
- Para la fase móvil:
Etanol.
Agua destilada.
- Disolución problema: Disolución de azul de metileno y anaranjado de metilo en etanol conteniendo aproximadamente 0.05 g/l decolorante.
Material e instrumentación necesarios
- Columna cromatográfica con tubo de látex y pinza de regulación de goteo.
- Lana de vidrio (sólo en el caso en el que la columna no incluya una base de...
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