Colorimetria
Páginas: 6 (1383 palabras)
Publicado: 14 de abril de 2011
OBJETIVOS:
1. Determinar el espectro visible de una sustancia coloreada.
2. Comprobar experimentalmente la ley de Beer-Lamber.
3. Aplicar la ley de Bee-Lambert para determinar la concentración de soluciones coloreadas o muestra biológicas.
4. Realizar una curva de calibración.
PROCEDIMIENTO:
1. Calibración del Espectrofotómetro con Blanco de Agua.
1. Verifique que el colorímetro esteen modo de transmitancia y que la longitud de onda del inicio sea 400 nm.
2. Ajuste el equipo a 0% T girando suavemente la perilla izquierda.
3. Prepare un tubo blanco de 5 ml de agua destilada, introdúzcalo en la celda, ciérrela y ajuste al 100& T, con la perilla derecha.
2. Curva espectral del KMnO4.
1. En un tubo de vidrio agregue 5 ml de solución de KMnO4 2,5 x 10-4 M.
2. Lea laabsorbancia de esta solución cada 10 nm en el rango de longitud de onda de 400 a 600 nm. No olvide calibrar cada vez que cambie de longitud de onda con el blanco de agua.
3. Registre sus datos en la tabla 2 y haga la gráfica en el papel milimetrado de absorbancia vs. Longitud de onda. (Gráfica 1)
4. Determine a cual longitud de onda el KMnO4 presenta la máxima absorbancia.
Tabla 2. Registro de losdatos del espectro de KMnO4 2,5 x 10 -4M
|λ (nm) |A |% T |λ (nm) |A |% T |
|400 |0.085 |82.2 |510 |0.538 |28,8 |
|410 |0.070 |85.0 |520 |0.588 |25,8 |
|420|0.045 |90.0 |530 |0.610 |24.0 |
|430 |0.061 |86.6 |540 |0.600 |25.0 |
|440 |0.081 |83.0 |550 |0.526 |29,8 |
|450 |0.102 |79.0|560 |0.436 |36,6 |
|460 |0.150 |70.6 |570 |0.343 |45,2 |
|470 |0.200 |63.2 |580 |0.231 |58,6 |
|480 |0.265 |54.2 |590 |0.150 |70,8|
|490 |0.353 |44.4 |600 |0.105 |78,4 |
|500 |0.450 |35.6 | | | |
La longitud de onda donde el KMnO4 presentó la máxima absorbancia fue en 530 nm con una absorbancia de 0,610.
3. Curva de calibración KMnO4Seleccione la longitud de onda donde el KMnO4 presentó mayor absorbancia. A partir de una solución de KMnO4 2,5 x 10-4 prepare los tubos del 1-5. No olvide calibrar antes el colorímetro con el Blanco. Para construir la curva de calibración debe calcular la concentración de cada patrón (Tubos 1-5) utilizando la fórmula ViCi=VfCf (anote sus cálculos).
| |TUBO (ml)|
|SOLUCIÓN | |
| |Blanco |1 |2 |3 |4 |5 |6 |
|H2O destilada|5 |4,5 ml |4,0 ml |3,5 ml |3,0 ml |2,5 ml |Muestra |
| | | | | | | |Problema |
|KMnO4 2,5 x 10-4M | |0,5 ml |1,0 ml |1,5 ml |2,0 ml |2,5 ml |...
1. Determinar el espectro visible de una sustancia coloreada.
2. Comprobar experimentalmente la ley de Beer-Lamber.
3. Aplicar la ley de Bee-Lambert para determinar la concentración de soluciones coloreadas o muestra biológicas.
4. Realizar una curva de calibración.
PROCEDIMIENTO:
1. Calibración del Espectrofotómetro con Blanco de Agua.
1. Verifique que el colorímetro esteen modo de transmitancia y que la longitud de onda del inicio sea 400 nm.
2. Ajuste el equipo a 0% T girando suavemente la perilla izquierda.
3. Prepare un tubo blanco de 5 ml de agua destilada, introdúzcalo en la celda, ciérrela y ajuste al 100& T, con la perilla derecha.
2. Curva espectral del KMnO4.
1. En un tubo de vidrio agregue 5 ml de solución de KMnO4 2,5 x 10-4 M.
2. Lea laabsorbancia de esta solución cada 10 nm en el rango de longitud de onda de 400 a 600 nm. No olvide calibrar cada vez que cambie de longitud de onda con el blanco de agua.
3. Registre sus datos en la tabla 2 y haga la gráfica en el papel milimetrado de absorbancia vs. Longitud de onda. (Gráfica 1)
4. Determine a cual longitud de onda el KMnO4 presenta la máxima absorbancia.
Tabla 2. Registro de losdatos del espectro de KMnO4 2,5 x 10 -4M
|λ (nm) |A |% T |λ (nm) |A |% T |
|400 |0.085 |82.2 |510 |0.538 |28,8 |
|410 |0.070 |85.0 |520 |0.588 |25,8 |
|420|0.045 |90.0 |530 |0.610 |24.0 |
|430 |0.061 |86.6 |540 |0.600 |25.0 |
|440 |0.081 |83.0 |550 |0.526 |29,8 |
|450 |0.102 |79.0|560 |0.436 |36,6 |
|460 |0.150 |70.6 |570 |0.343 |45,2 |
|470 |0.200 |63.2 |580 |0.231 |58,6 |
|480 |0.265 |54.2 |590 |0.150 |70,8|
|490 |0.353 |44.4 |600 |0.105 |78,4 |
|500 |0.450 |35.6 | | | |
La longitud de onda donde el KMnO4 presentó la máxima absorbancia fue en 530 nm con una absorbancia de 0,610.
3. Curva de calibración KMnO4Seleccione la longitud de onda donde el KMnO4 presentó mayor absorbancia. A partir de una solución de KMnO4 2,5 x 10-4 prepare los tubos del 1-5. No olvide calibrar antes el colorímetro con el Blanco. Para construir la curva de calibración debe calcular la concentración de cada patrón (Tubos 1-5) utilizando la fórmula ViCi=VfCf (anote sus cálculos).
| |TUBO (ml)|
|SOLUCIÓN | |
| |Blanco |1 |2 |3 |4 |5 |6 |
|H2O destilada|5 |4,5 ml |4,0 ml |3,5 ml |3,0 ml |2,5 ml |Muestra |
| | | | | | | |Problema |
|KMnO4 2,5 x 10-4M | |0,5 ml |1,0 ml |1,5 ml |2,0 ml |2,5 ml |...
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