Comparación de métodos de lisis y extracción de ADN de trofozoítos de Giardia lamblia
Páginas: 3 (725 palabras)
Publicado: 17 de febrero de 2015
Comparación de métodos de lisis y extracción de ADN de trofozoítos de Giardia lamblia
Giardia lamblia (sinónimos: G. intestinalis, G. duodenalis) es el protozoo intestinal productor de diarrea nobacteriana diagnosticado con más frecuencia en todo el mundo, afectando prin-cipalmente a niños de países desarrollados y en desarrollo. El diagnóstico convencional se realiza por observaciónmicroscópica o por detección de antígenos o anticuerpos. Ambos métodos tienen sus limitaciones. El desarrollo de métodos moleculares ha creado la necesidad de implementar técnicas simples y eficientes deextracción de ADN.
El aislamiento de ADN de alto peso molecular, intacto y con el menor número de contaminantes es esencial para la aplicación de técnicas moleculares tales como RFLP (polimorfismo delongitud de fragmentos de restricción), hibridización, PCR (reacción en cadena de la polimerasa), PFGE (electroforesis en gel de campo pulsante) , Southern blot, ADN microarrays y construcción debiblioteca genómica4.
Existe abundante bibliografía sobre la extracción y purificación de ácidos nucleicos de protozoos. No obstante, los protocolos standards y métodos comerciales disponibles en laactualidad no presentan patrones de rendimiento homo-géneos. En consecuencia, es fundamental determinar el sistema de extracción y purificación de ácidos nucleicos más adecuado para cada tipo de muestra.Para optimizar la metodología de extracción de ADN, se compararon distintos procedimientos de lisis y purificación de ácidos nucleicos. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la eficiencia de cincoprotocolos de lisis y tres métodos de purificación de ADN de trofozoítos de G. lamblia.
arásitos: Se partió de un cultivo en fase exponencial de una línea clonal de trofozoítos de G. lamblia(GS/M-83-H7) en medio TYI-S-33 modificado cedido gentilmente por el Dr. Pablo Pérez del Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos, CIDCA). Los parásitos se desprendieron de la...
Giardia lamblia (sinónimos: G. intestinalis, G. duodenalis) es el protozoo intestinal productor de diarrea nobacteriana diagnosticado con más frecuencia en todo el mundo, afectando prin-cipalmente a niños de países desarrollados y en desarrollo. El diagnóstico convencional se realiza por observaciónmicroscópica o por detección de antígenos o anticuerpos. Ambos métodos tienen sus limitaciones. El desarrollo de métodos moleculares ha creado la necesidad de implementar técnicas simples y eficientes deextracción de ADN.
El aislamiento de ADN de alto peso molecular, intacto y con el menor número de contaminantes es esencial para la aplicación de técnicas moleculares tales como RFLP (polimorfismo delongitud de fragmentos de restricción), hibridización, PCR (reacción en cadena de la polimerasa), PFGE (electroforesis en gel de campo pulsante) , Southern blot, ADN microarrays y construcción debiblioteca genómica4.
Existe abundante bibliografía sobre la extracción y purificación de ácidos nucleicos de protozoos. No obstante, los protocolos standards y métodos comerciales disponibles en laactualidad no presentan patrones de rendimiento homo-géneos. En consecuencia, es fundamental determinar el sistema de extracción y purificación de ácidos nucleicos más adecuado para cada tipo de muestra.Para optimizar la metodología de extracción de ADN, se compararon distintos procedimientos de lisis y purificación de ácidos nucleicos. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la eficiencia de cincoprotocolos de lisis y tres métodos de purificación de ADN de trofozoítos de G. lamblia.
arásitos: Se partió de un cultivo en fase exponencial de una línea clonal de trofozoítos de G. lamblia(GS/M-83-H7) en medio TYI-S-33 modificado cedido gentilmente por el Dr. Pablo Pérez del Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos, CIDCA). Los parásitos se desprendieron de la...
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