Composición de lipidos, perfil de fosfolipidos y acidos grasos de la mucosa cecal de rata.
Páginas: 17 (4087 palabras)
Publicado: 2 de noviembre de 2011
COMPOSICIÓN DE LIPIDOS, PERFIL DE FOSFOLIPIDOS Y ACIDOS GRASOS DE LA MUCOSA CECAL DE RATA.
INTRODUCCIÓN
En ocasiones se presentan dificultades en recabar información sobre las cadenas de grupos acilo grasos de los fosfolípidos cuando se realizan estudios bioquímicos a cerca de la mucosa. Los fosfolípidos están constituidos por dos largas cadenas de grupos acilo grasos no polares unidas(casi siempre a través de un enlace éster) a pequeños grupos altamente polares, incluido un fosfato. Los fosfolípidos se asocian en forma no covalente para construir la bicapa y la estructura básica de las biomembranas. Los componentes extracelulares primarios de todas las biomembranas son los fosfolípidos, cuyas propiedades físicas son las responsables de la formación de la estructura laminar delas membranas.
La composición del tejido adiposo juega papeles importantes en la regulación de la función celular:
- Estructural. Cuando los ácidos grasos se incorporan a fosfolípidos de la membrana puede haber una alteración en las características fisicoquímicas como la micro viscosidad y la fluidez de la matriz lipídica de la membrana.
- En las familias de ácidos grasos n - 6 y n – 3(también conocidas como ω–6 y ω–3, se diferencian por la posición del primer doble enlace contando a partir del extremo metilo de la molécula del ácido graso), cuando se libera fosfolípidos de los depósitos de la membrana, estos son transportados por las enzimas ciclooxigenasa y lipoxigenasa de las prostaglandinas, tromboxanos y leucotrineos. Estos eicosaniodes son los segundos mensajeros de lascélulas cuando convierten una determinada señal o estímulo exterior, en otra señal o respuesta específica.
Las ratas como parte de su extensión gastrointestinal tienen un pronunciado intestino ciego (parte que comunica el intestino delgado con el grueso a través de la válvula ileocecal). El intestino ciego de rata ha sido caracterizado como un deposito para el contenido intestinal de variasfloras microbianas que ayudan a la digestión de celulosa, carbohidratos y péptidos por proceso de fermentación microbiana. Es por ello que podrían existir lípidos únicos en la mucosa cecal, estos lípidos tal vez estarían relacionados con funciones de transducción, fisicoquímicas y/o bioquímicas.
En este artículo se presenta un estudio y un análisis detallado de los lípidos de la mucosa cecal derata, incluyendo la composición de sus ácidos grasos. Con los resultados obtenidos se realizo una discusión sobre su posible importancia fisiología.
MATERIALES Y METODOS
Extracción de lípidos
Se cuidaron ratas para ser sacrificadas y obtener la mucosa de su CAECUM. Ratas macho con un peso de 250-300, durante un periodo de 8:00 a 20:00 h se alimento y mantuvo al animal a 21 ºC en unahabitación, se sacrifico al animal por dislocación cervical y después se decapitó
Se le retiro el intestino de cada rata, se enjuago con una solución salina fisiológica helada y se registraron los pesos, su mucosa con un peso de aproximadamente 0.5g fue retirada con un portaobjetos, pesada e inmediatamente congelada con nitrógeno y almacenada a -70ºC hasta el análisis de los lípidos.
Seextrajeron los lípidos totales del CAECUM siguiendo el método de Folch, en presencia del 0.01% m/v BHT (butilhidroxitolueno) como antioxidante.
La disociación del tejido se logro por una homogenización en frio de cloroformo/metanol (2:1 v/v) conteniendo 0.01% BHT, usando una Ultra-Turrax modelo Tip-TP-18-1 (homogenizador).
Separación y cuantificación de los lípidos
Los lípidos de la CAEUCM sesometieron a varios procesos para la separación de los fosfolípidos en triglicéridos, diacilgliceridos y ácidos grasos con diferentes soluciones. Estos fueron separados en 60 placas cromatograficas de gel de silicio (TLC) de capa fina.
Las placas fueron desarrolladas usando un solvente compuesto por hexano/dietil/éter/acetilico acido (80:20:1) respectivamente, dejándolas evaporar.
Las zonas...
INTRODUCCIÓN
En ocasiones se presentan dificultades en recabar información sobre las cadenas de grupos acilo grasos de los fosfolípidos cuando se realizan estudios bioquímicos a cerca de la mucosa. Los fosfolípidos están constituidos por dos largas cadenas de grupos acilo grasos no polares unidas(casi siempre a través de un enlace éster) a pequeños grupos altamente polares, incluido un fosfato. Los fosfolípidos se asocian en forma no covalente para construir la bicapa y la estructura básica de las biomembranas. Los componentes extracelulares primarios de todas las biomembranas son los fosfolípidos, cuyas propiedades físicas son las responsables de la formación de la estructura laminar delas membranas.
La composición del tejido adiposo juega papeles importantes en la regulación de la función celular:
- Estructural. Cuando los ácidos grasos se incorporan a fosfolípidos de la membrana puede haber una alteración en las características fisicoquímicas como la micro viscosidad y la fluidez de la matriz lipídica de la membrana.
- En las familias de ácidos grasos n - 6 y n – 3(también conocidas como ω–6 y ω–3, se diferencian por la posición del primer doble enlace contando a partir del extremo metilo de la molécula del ácido graso), cuando se libera fosfolípidos de los depósitos de la membrana, estos son transportados por las enzimas ciclooxigenasa y lipoxigenasa de las prostaglandinas, tromboxanos y leucotrineos. Estos eicosaniodes son los segundos mensajeros de lascélulas cuando convierten una determinada señal o estímulo exterior, en otra señal o respuesta específica.
Las ratas como parte de su extensión gastrointestinal tienen un pronunciado intestino ciego (parte que comunica el intestino delgado con el grueso a través de la válvula ileocecal). El intestino ciego de rata ha sido caracterizado como un deposito para el contenido intestinal de variasfloras microbianas que ayudan a la digestión de celulosa, carbohidratos y péptidos por proceso de fermentación microbiana. Es por ello que podrían existir lípidos únicos en la mucosa cecal, estos lípidos tal vez estarían relacionados con funciones de transducción, fisicoquímicas y/o bioquímicas.
En este artículo se presenta un estudio y un análisis detallado de los lípidos de la mucosa cecal derata, incluyendo la composición de sus ácidos grasos. Con los resultados obtenidos se realizo una discusión sobre su posible importancia fisiología.
MATERIALES Y METODOS
Extracción de lípidos
Se cuidaron ratas para ser sacrificadas y obtener la mucosa de su CAECUM. Ratas macho con un peso de 250-300, durante un periodo de 8:00 a 20:00 h se alimento y mantuvo al animal a 21 ºC en unahabitación, se sacrifico al animal por dislocación cervical y después se decapitó
Se le retiro el intestino de cada rata, se enjuago con una solución salina fisiológica helada y se registraron los pesos, su mucosa con un peso de aproximadamente 0.5g fue retirada con un portaobjetos, pesada e inmediatamente congelada con nitrógeno y almacenada a -70ºC hasta el análisis de los lípidos.
Seextrajeron los lípidos totales del CAECUM siguiendo el método de Folch, en presencia del 0.01% m/v BHT (butilhidroxitolueno) como antioxidante.
La disociación del tejido se logro por una homogenización en frio de cloroformo/metanol (2:1 v/v) conteniendo 0.01% BHT, usando una Ultra-Turrax modelo Tip-TP-18-1 (homogenizador).
Separación y cuantificación de los lípidos
Los lípidos de la CAEUCM sesometieron a varios procesos para la separación de los fosfolípidos en triglicéridos, diacilgliceridos y ácidos grasos con diferentes soluciones. Estos fueron separados en 60 placas cromatograficas de gel de silicio (TLC) de capa fina.
Las placas fueron desarrolladas usando un solvente compuesto por hexano/dietil/éter/acetilico acido (80:20:1) respectivamente, dejándolas evaporar.
Las zonas...
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