concentración de michaelis
1. ¿Cuál es el significado de KM?
KM tiene 2 significados:
- Primero, KM es la [S] a la cual la mitad de los centros activos están ocupados.
-Segundo, KM es la medida de estabilidad del complejo ES.
2. ¿Todas las enzimas presentan el mismo valor numérico de KM?
No
3. ¿Cuál es el significado de un KM alto y un KM bajo?
KM alto: Indica una unión débil entre la E y el S.
KMbajo: Indica una unión fuerte entre la E y el S.
4. ¿A que se denomina velocidad máxima de una reacción enzimática?
Vmax: es el número de recambio de una enzima, que es el número de moléculas de sustrato convertidas en producto por unidad de tiempo por una molécula de enzima cuando esta está talmente saturada de sustrato.
5._ ¿A que se denomina velocidad máxima en una reacción enzimática?
Lavelocidad máxima viene a ser la mayor cantidad de sustrato convertido en producto, junto con el Km vienen a ser parte esencial para entender el proceso de cómo funcionan las enzimas para el control del metabolismo.
6._ Utilizando la ecuación final obtenida por Michaelis – Menten
a) Despejar el valor de Km en función de las otras variables.
b) Despejar el valor de (S) en función de lasotras variables.
C) Despejar el valor de Vmax en función de las otras variables.
7. ¿En que unidades se expresa KM?
En µM
8. ¿Qué importancia tiene la determinación del KM de una enzima?
Es una característica muy importante para la función biológica de la Enzima, ya que así podemos saber cómo trabaja una enzima a diferentes concertaciones de sustrato [S].
9)parámetros:
- constante de velocidad K-1 (que se obtendrá de la disociación de E y S)
- constante de K2 (continuara con la disociación hasta formar un producto P)
- constante de velocidad (resultado de una enzima E se combina con S para formar un complejo ES)
* KM= constante de disociación del complejo ES, si k2 es mucho menor que k-1.
10)
se puede determinar con exactitud si la ecuación demichaelis - menten se transforma en otra que proporcione una representación lineal. si, tomamos la reciproca a ambos miembros de la ecuación (23):
Una representación de 1/Vo frente a 1/(S), llamada de Lineweaverburk o representación doble recíproca, genera una línea recta con una intersección de 1/Vmax y una pendiente de KM/Vmax (fig. 8.36).
La intersección con el eje x es -1/KM.
Figura (8.36)Representación doble reciproca o de Lineweaver- Burk. Una representación doble reciproca de la cinética de una enzima se genera representando 1/Vo en función de 1/(S): La pendiente es KM/Vmax, la intersección con el eje vertical es 1/Vmax y la intersección con el eje horizontal es -1/KM.
PRATICA 1
1. ¿Cuál es el propósito de cada tubo?
Observar en cada uno de ellos como se da, que factoresafectan y a qué velocidad se da la actividad enzimática.
¿Cuál es el tubo control?
El tubo control es una solución que contiene una cantidad conocida de sustancia que se va a cuantificar y sirve para tomarla de referencia en el momento en que se mida la muestra real. En este caso actuaron como tubos control: 1, 1 (B) y blanco (como referencia para las tres experiencias) ya que en estos no seformó ninguna base
¿Es necesario más de un tubo control?
No, ya que solo se necesita como referencia.
2) Observe las reacciones en los tubos de titulación y anotar sus observaciones.
Después del sistema de incubación de los tubos 1 y 2; agregamos en los tubos 1(B) y 2(B) 2mL de estos para agregarles rojo de metilo al 0.04 % se observó q en ambos la solución torno amarillenta procedimos a titularcon HCl hasta que torne en ambos una coloración rosa pálido que dará por finalizada esta. Las observaciones en el tubo 1(B) fueron que con solo 0.15 mL se tornó al color rosa pálido lo que se indicó como tubo control, en el tubo 2(B) para que se torne rosa pálido en la titulación de HCl requirió 2.40 mL lo que se indicó como un tubo problema que requiere de más ácido para poder neutralizar se....
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