Conservación de microorganismos



PRACTICA 13
CONSERVACION DE MICROORGANISMOS
Objetivo General
El alumno aplicará algunos métodos para la conservación de microorganismos.
Objetivos específicos:
Aplicar métodos de conservación para bacterias y hongos a corto plazo
Comprobar la viabilidad de los microorganismos a los que se les aplicó algún método de conservación.
INTRODUCCIÓN
Los microorganismos que sonseleccionados por producir algún metabolito importante industrialmente no deben de sufrir cambios metabólicos, por lo que es importante conservarlos, el método elegido debe ser el adecuado para que no varíen sus características genéticas.
Existen varios métodos para la conservación de microorganismos donde la elección del método estará encaminada a retener las características de la cepa, estastécnicas se mencionan a continuación así como algunas diferencias entre ellas. (Cada uno de estos métodos presenta dos o más variaciones):
Durante un programa de aislamiento y selección han demostrado tener y mantener las características requeridas por la industria, se deben someter a un estudio estricto acerca de los cambios que pueden sufrir cuando se someten a algún procedimiento de conservación;así pues, el método de conservación elegido juega un papel importante en la industria de fermentación.
Parámetros para observar el funcionamiento del microorganismo.
Criterios generales para seleccionar el medio:
- Tiempo.
- Tipo de microorganismo
- Forma de reproducción del microorganismo
Conservación a Corto plazo
Resiembra en serie en tubos inclinados y en medio líquido enrefrigeración con una duración de 15 a 20 días de almacenamiento. Tapa de aceite mineral, tapa de cera, con una duración de 12 a 36 meses de almacenamiento.
a) Cultivos profundos en agar – extracto de suelo, este es un método adecuado para el mantenimiento de microorganismos anaerobios los cuales han sido aislados de suelo.
b) Mantenimiento de cultivos en tubos inclinados de agar y en medioslíquidos. Este es un método de conservación muy empleado en cultivos que se emplean continuamente (cultivos de trabajo).
LABORATORIO DE TÉCNICAS MICROBIOLÓGICAS- UPIBI-IPN
Por otro lado las resiembras sucesivas y continuas aunadas a los cambios que sufre el medio propiciarán cambios genéticos indeseables en los cultivos, lo cual se reflejará en los rendimientos de la cepa. Aunque estemétodo es el más usado y normalmente se aplica a hongos, bacterias, levaduras actinomyces y algas.
c) Cultivos en tubos inclinados con agar adicionado de aceite mineral. A los cultivos preservados por el método anterior, se les puede adicionar un aceite mineral como Amerol o Nugol, con esto se disminuyen las posibilidades de contaminación, de tal forma que los cultivos pueden mantenerse pormás tiempo, aunque no se elimina el problema de los cambios genéticos que pueden sufrir la cepa. Los cultivos mantenidos en agar inclinado ya sea con o sin aceite mineral deben ser protegidos con capuchón métalico o de papel parafina.
Mantenimiento de cultivos por congelamiento.
En muchas ocasiones es más conveniente mantener un cultivo usando técnicas menos convencionales, de tal forma que unade las empleadas es por congelamiento del cultivo este método tiene el inconveniente de que la velocidad de muerte del microorganismo será mayor cuando menos baja sea la temperatura de mantenimiento, además también durante el proceso de congelamiento algunas células mueren. En la conservación de cultivos por este procedimiento, se requiere equipo capaz de mantener temperatura de enfriamientobastantes bajas, esto puede lograrse con el uso de nitrógeno líquido.
Congelación (a -20 ° C en glicerol) se mezcla con el microorganismo.
Este tipo de conservación es utilizada en la práctica común, para trabajo continuo, mantiene un ritmo elevado de metabolismo, no es recomendable para trabajos largos ya que provoca mucho estrés al microorganismo, porque la reactivación es muy rápida....