consulta bcm
Páginas: 10 (2380 palabras)
Publicado: 9 de marzo de 2014
CONSULTA
Fundamento de la coloración de Gram y ziehl Neelsen.
La tinción de Gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaños, morfologías celulares y reacción Gram (color).
R/: coloración de Gram
Es probable que la diferencia entre las bacterias grampositivas y gramnegativas se deba a la naturaleza física de sus paredes celulares. El peptidoglicano no se tiñepor sí mismo, más bien parece actuar como barrera de permeabilidad para evitar la pérdida de cristal violeta. Durante
el proceso de coloración las bacterias se tiñen primero con cristal violeta y luego se tratan con yoduro para favorecer la retención del colorante. En la decoloración con etanol, se cree que el alcohol contrae los poros de la capa gruesa de peptidoglicano y se retiene elcomplejo colorante yoduro; así las bacterias adquieren color violeta. Por el contrario, la capa de peptidoglicano de las bacterias gramnegativas es muy fina, con menos enlaces y con poros de mayor tamaño. Además, es posible que le tratamiento con alcohol extraiga suficientes lípidos de la membrana externa como para aumentar su porosidad. Por estos motivos el alcohol elimina más fácilmente elcomplejo cristal violeta yoduro en las bacterias gramnegativas
Coloración ziehl Neelsen
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos.
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren lapropiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistentes. Las micobacterias como Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana quecontiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se vende color azul ya que se utiliza azul de metileno como tinción de contraste.
Diferencia molecular entre la pared bacteriana Gram negativa y Gram positiva.
La pared celular de las bacterias Gram positivas
La pared celular de las bacterias Gram negativas
La red de mureína está muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas
La red de mureína presenta una sola capa
Los aminoácidosimplicados varían de una especie a otra.
La constitución del saco de mureína es igual en todas las bacterias Gram negativas
La constitución del esqueleto es característica de la especie y constituye una buen parámetro taxonómico
Contiene siempre únicamente meso-diaminopimélico
Es frecuente la presencia de los aminoácidos LL-diaminopimélico o de lisina
Nunca contiene lisina
Lospolisácaridos están unidos por enlaces covalentes (en el caso de tenerlos) Su contenido proteico es bajo.
No se encuentran puentes interpeptídicos.
Se encuentran grandes cantidades de lipoproteínas y lipopolisacáridos que representan hasta el 80 % del peso seco de la pared celular. Para mantener la estabilidad de las capas de lipopolisacáridos es necesario el ión Ca++.
En ellase encuentran ácidos teicoicos
En las bacterias Gram negativas la capa de mureína puede ser atacada por la lisozima cuando se las trata con EDTA (Etilen-diamino-tetracético). Este agente, al quelar el Ca++ libera una parte de los lipopolisacáridos y permite la acción de la enzima..
Hasta ahora no han podido demostrarse ácidos teicoicos.
La diferencia entre técnicas de coloración simple, diferenciales,...
Fundamento de la coloración de Gram y ziehl Neelsen.
La tinción de Gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaños, morfologías celulares y reacción Gram (color).
R/: coloración de Gram
Es probable que la diferencia entre las bacterias grampositivas y gramnegativas se deba a la naturaleza física de sus paredes celulares. El peptidoglicano no se tiñepor sí mismo, más bien parece actuar como barrera de permeabilidad para evitar la pérdida de cristal violeta. Durante
el proceso de coloración las bacterias se tiñen primero con cristal violeta y luego se tratan con yoduro para favorecer la retención del colorante. En la decoloración con etanol, se cree que el alcohol contrae los poros de la capa gruesa de peptidoglicano y se retiene elcomplejo colorante yoduro; así las bacterias adquieren color violeta. Por el contrario, la capa de peptidoglicano de las bacterias gramnegativas es muy fina, con menos enlaces y con poros de mayor tamaño. Además, es posible que le tratamiento con alcohol extraiga suficientes lípidos de la membrana externa como para aumentar su porosidad. Por estos motivos el alcohol elimina más fácilmente elcomplejo cristal violeta yoduro en las bacterias gramnegativas
Coloración ziehl Neelsen
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos.
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren lapropiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistentes. Las micobacterias como Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana quecontiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se vende color azul ya que se utiliza azul de metileno como tinción de contraste.
Diferencia molecular entre la pared bacteriana Gram negativa y Gram positiva.
La pared celular de las bacterias Gram positivas
La pared celular de las bacterias Gram negativas
La red de mureína está muy desarrollada y llega a tener hasta 40 capas
La red de mureína presenta una sola capa
Los aminoácidosimplicados varían de una especie a otra.
La constitución del saco de mureína es igual en todas las bacterias Gram negativas
La constitución del esqueleto es característica de la especie y constituye una buen parámetro taxonómico
Contiene siempre únicamente meso-diaminopimélico
Es frecuente la presencia de los aminoácidos LL-diaminopimélico o de lisina
Nunca contiene lisina
Lospolisácaridos están unidos por enlaces covalentes (en el caso de tenerlos) Su contenido proteico es bajo.
No se encuentran puentes interpeptídicos.
Se encuentran grandes cantidades de lipoproteínas y lipopolisacáridos que representan hasta el 80 % del peso seco de la pared celular. Para mantener la estabilidad de las capas de lipopolisacáridos es necesario el ión Ca++.
En ellase encuentran ácidos teicoicos
En las bacterias Gram negativas la capa de mureína puede ser atacada por la lisozima cuando se las trata con EDTA (Etilen-diamino-tetracético). Este agente, al quelar el Ca++ libera una parte de los lipopolisacáridos y permite la acción de la enzima..
Hasta ahora no han podido demostrarse ácidos teicoicos.
La diferencia entre técnicas de coloración simple, diferenciales,...
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