Contabilidad
• Ivan Roit “Inmunología” 2ª Edición. Salvat. Barcelona 1991. • S. Sell “Immunology, Inmunopathology and immunity” Elsevier. New York 1987. • E.S. Golub “Immunology: A synthesis” Sinama Associates Inc. Massachussets 1987. • L.A. Kaplan, A.J. Pesce “Química Clínica” Ed. Médica Panamericana. Buenos Aires 1988.
INTRODUCCIÓN AL ANÁLISISINMUNOQUÍMICO
1. Introducción 2. Reactivos que participan en la reacción inmunológica 2.1. Antígenos y anticuerpos 2.2. Clases de inmunoglobulinas 2.3. El anticuerpo como reactivo analítico 3. La reacción inmunológica 4. Clasificación de los inmunoensayos 5. La reacción de inmunoprecipitación: inmunoturbidimetría e inmunonefelometría 6. La reacción de aglutinación.
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INTRODUCCIÓN AL ANÁLISISINMUNOQUÍMICO
OBJETIVOS
Familiarizarse con la terminología utilizada en análisis inmunoquímico Conocer las características de los reactivos que se utilizan en análisis inmunoquímico, así como las de la reacción inmunológica. Tener una visión general de los diferentes métodos inmunoquímicos de análisis. Reconocer los problemas que se pueden resolver mediante inmunoensayos directos e Interpretar losresultados obtenidos en los mismos.
INTRODUCCIÓN AL ANÁLISIS INMUNOQUÍMICO
Métodos Inmunoquímicos de Análisis o Inmunoensayos
Métodos de análisis que se basan en la reacción inmunológica Empleo con fines analíticos de reactivos de origen biológico que se caracterizan por su elevada selectividad
1. Reconocer moléculas extrañas
2. Producir distintas células y proteinas que tratan deanular a las sustancias extrañas
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Introducción
El Sistema Inmune
(http://nobelprize.org/educational_games/medicine/immunity/immune-detail.html)
Reactivos que participan en la reacción inmunológica Concepto de Antígeno y Anticuerpo
Molécula capaz de inducir respuesta inmune y de ser reconocida por los anticuerpos o células sensibilizadas producidas como consecuencia de dicha respuesta.Antígeno (Ag)
Reacción Ag-Ac
Anticuerpo (Ac)
Molécula proteica formada por estimulación con el antígeno que reacciona específicamente con este
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Reactivos que participan en la reacción inmunológica
Inmunogenicidad: Capacidad de producir respuesta inmune
Inmunógeno
Producción de Anticuerpos
Antigenicidad : Capacidad de reaccionar con el producto de la respuesta inmunePortador-hapteno No produce Anticuerpos Anti-portador Anti-hapteno
pero No-inmunógeno HAPTENO Antigénico
Reactivos que participan en la reacción inmunológica Tipos de antígenos Tipo Metales Compuestos orgánicos pequeños Proteinas Lipoproteinas Glicoproteinas Polipeptidos Nucleoproteinas ADN ARN Ejemplo
Niquel Dinitrofenol, fenilarsonato Proteinas séricas, enzimas toxinas microbianas Membranascelulares Polisacáridos ramificados que determinan el grupo sanguíneo Hormonas (insulina), Compuestos sintéticos (poli-L-lisina) Factor Lupus erythematosus
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Estructura Básica de las Inmunoglobulinas
Fab Región variable
-NH2 terminal
Fc
papaina
Cadena pesada Sitios de unión con el antígeno
Región bisagra
-COOH terminal
pepsina
-NH2 terminal
Cadena ligera F(ab´)2Carbohidratos
Puente disulfuro
Clases de Inmunoglobulinas IgG IgA
Componente secretor
Cadena J
MW = 150000 75% inmunoglobulinas séricas
MW = 350000 15% inmunoglobulinas séricas Predomina en secreciones externas
IgM
Cadena J
IgD
Superficie de linfocitos B MW = 150000
IgE
MW = 900000 10% inmunoglobulinas séricas Predomina en la respuesta inicial
MW = 190000
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ElAnticuerpo como Reactivo Analítico
1. Exposición del animal de manera repetida al Antígeno
Antígeno
2. Extracción de sangre al animal inmunizado
Debido a la heterogeneidad de la respuesta inmune el suero sanguíneo del animal tiene gran variedad de anticuerpos contra el antígeno inyectado, que difieren en especificidad y afinidad por el mismo.
Purificación Cromatografía de afinidad...
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