CONTAMINACIÓN DE MATERIAL IN VITRO Y MÉTODOS DE INDEXACIÓN

CONTAMINACIÓN DE MATERIAL IN VITRO Y MÉTODOS DE INDEXACIÓN
Presentado por: Carolina Arango, Bióloga. Universidad de Córdoba
1. INTRODUCCIÓN
Las técnicas de cultivo in vitro de tejidos vegetales actualmente constituye un pilar fundamental en el desarrollo potencial y biotecnológico a nivel mundial, ya que apuntan a un proceso de mejoramiento de las plantas, conservación y posteriormente eluso de estos recursos fitogenéticos, a partir del estudio constante de procesos que permiten avanzar y fortalecer el área, aportando nuevas y ventajosas tecnologías comparadas con el cultivo convencional. Mediante técnicas de cultivo se idealiza la obtención de plantas libres de microorganismos contaminantes, ya que se utilizan condiciones en ambientes de cultivo controladas. Las metodologíasespecíficas que se relacionan con el cultivo in vitro, necesitan además de un control de los factores físicos del medio utilizado, condiciones de asepsia total, sin embargo, en muchas ocasiones esta situación no es del todo perfecta, ya que las plantas propagadas mediante la técnica de cultivo de tejidos, tanto en laboratorios establecidos como en investigación, muchas veces se ve afectada porcontaminación microbial (bacterias, hongos y virus), las cuales son comunes en plantas in vivo, pero nocivas para plantas in vitro (Aguilar, 2000)
Por lo anterior surge la necesidad de implementar medidas que planteen un manejo adecuado y a la vez integrado de control biológico, ya que el éxito de los sistemas de propagación de plantas por biotecnología depende en gran medida del control y la prevenciónde la contaminación microbiana (Hernández, et. al., 2010)
Existen estrategias para manejar la contaminación. Algunas de ellas incluyen la prevención mediante la selección y el tratamiento de la planta madre, desinfección superficial del explante y la identificación de los organismos contaminantes, uso de sustancias antimicrobianas y cultivo de meristemos (Hernández, et. al., 2010), procesosque se desarrollan bajo el contexto de indexación, el cual hace referencia a la comprobación del estado sanitario de una planta con respecto a enfermedades mediante métodos biológicos, físicos, químicos o moleculares.
Las plantas regeneradas in vitro deben ser evaluadas en pruebas llamadas ensayos de indexación y difieren según el sistema huésped-patógeno de que se trate. Dentro de estas pruebaspueden utilizarse: selección visual u observación de síntomas, empleo de hospedantes indicadores, métodos serológicos y microscopía electrónica, entre otras (Rivero, 2008). Estos métodos de indexación se utilizan para la evaluación de la regeneración de plantas sanas a partir de otras contaminadas.
En cuanto a la conservación de material in vitro (germoplasma), también se deben establecerestrategias de indexación, ya que existe un gran riesgo de introducir nuevos cultivos con patógenos que pueden ser dispersados internacionalmente (ICA; FEDERCAFÉ; ICCA, 1999).

En este documento se hará incapié en los agentes contaminantes más comunes dentro del material in vitro, métodos de indexación más utilizados y recopilación de trabajos que aportan al desarrollo en este tema.
2.CONTAMINACIÓN DE MATERIAL IN VITRO
Aguilar (2000), en su trabajo de investigación (contaminación en un laboratorio de cultivo de tejidos: detección y medidas de control) menciona la existencia de cuatro fuentes de infección de contaminantes: la planta (su exterior e interior), medio nutritivo (no esterilizado), el aire y el operador (trabajo poco preciso).
En condiciones in vitro, los hongos, bacterias,levaduras y con menos frecuencia virus, viroides y microartrópodos (ácaros y trips), constituyen la principal fuente de contaminación. Estos agentes contaminantes son llamados vitropatógenos, ya que no necesariamente son patógenos para las plantas en campo, pero sí lo son para células, tejidos u órganos que se cultivan en material de vidrio (Hernández, et. al., 2010).

Una proporción...