COOMBS 2015

T.M. : Hernan García Neyra
Banco de Sangre.

PRUEBA DE ANTIGLOBULINA O DE
COOMBS
Prueba

serológica considerada la más eficiente y
de mayor valor en
el banco de sangre para
demostrar la presencia de Ag o Acs de grupos
sanguíneos.
•

Fue descrito por Moreschi en 1908.

•

Coombs, Mourant y Race introdujeron en medicina
clínica, para el estudio de los grupos sanguíneos y
de los Acs.

* Demostraronque podía ser usada para detectar Acs
incompletos anti-Rh en el suero ó para evidenciar la
sensibilización de los GR in vivo, así como también
en el Dx de la EHRN.

FUNDAMENTO DE LA PRUEBA DE
ANTIGLOBULINA SE BASA EN LOS
SIGUIENTES PRINCIPIOS:
1. Los Anticuerpos y el Complemento humano
son globulinas, diferentes a las de otras
especies; por lo tanto, se comportan como
antígenos cuando seinyectan en otros
organismos.
2. Los animales inyectados con globulinas
humanas purificada las reconocen como
extrañas y elabora anticuerpos contra
ellos obteniéndose el suero Antiglobulina
Humana o Suero de Coombs.
3. El Suero Antiglobulina Humana obtenido
reaccionará
específicamente
con
la

PRUEBA DE ANTIGLOBULINA HUMANA
Si moléculas de globulinas, sean anticuerpos o
complemento se fijan en lamembrana del glóbulo
rojo, el suero antiglobulina se combinará con ellas
y causará aglutinación de las moléculas.

Si los glóbulos rojos no están sensibilizados, no
habrá aglutinación.

REACTIVOS ANTIGLOBULINICOS
1. El Reactivo de Antiglobulina se
prepara
inyectando
con
Gammaglobulina
Humana
purificada en conejos para obtener
suero Antiglobulina Humana.
Otros son inyectados con
componentes
purificadosdel
Complemento (c3), para producir
anticuerpos específicos contra ellos
(anti-c3 con actividad anti-c3d y
contra otros determinantes de c3).

ESTIMULACION PARA LA PRODUCCION DE
ANTIINMUNOGLOBULINA

ESTIMULACION PARA LA PRODUCCION DE
ANTI-INMUNOGLOBULINA

REACCION DE ANTIINMUNOGLOBULINA DE COOMBS

PRUEBA DE ANTIGLOBULINA HUMANA
2. LOS REACTIVOS MONOCLONALES
MONOESPECÍFICOS
TAMBIÉN PUEDENOBTENERSE A
PARTIR DE HIBRIDOMAS.
La aplicación y perfeccionamiento
de la técnica de los hibridomas
(Kohler, 1975) ha permitido el uso de
los sueros reactivos con anticuerpos
monoclonales, es decir, derivados de
una clona única de células y poseen
por tanto una sola especificidad.

PRUEBA DE ANTIGLOBULINA HUMANA


Los dos tipos de Acps son combinados
para producir el suero poliespecifico
antihumanoque
es
una
mezcla
proporcional
de
Anti-IgG
y
Anticomplemento
(c3d)
el
cual
reaccionará con GR sensibilizados con IgG
y/o complemento, debiendo dar en cada
una reacciones optimas de aglutinación

Anticuerpos Policlonales y Monoclonales
 Cuando

se realiza una inmunización con el
objeto de producir anticuerpos frente a un
antígeno, se produce gran variedad de
inmunoglobulinas (Ac policlonales) queposeen función de Ac frente a diferentes
epitopes del antígeno.

 Los

anticuerpos
monoclonales
son
reactivos biológicos homogéneos en su
actividad, en contraste con los antisueros
convencionales (policlonales) que son una
mezcla variable de inmunoglobulinas.
11

Anticuerpos Policlonales
 La

inmunización de animales inyectando
antígeno por la vía adecuada, en dosis
adecuadas y en el adyuvanteadecuado,
(inmunógeno) estimula la producción de
anticuerpos con diferentes afinidades y
con especificidad por diferentes
determinantes antigénicos

Anticuerpos Policlonales

G
Ig

Conejo, cabra, oveja, etc.

Purificación de
anticuerpos

Separar el
suero

Anticuerpos monoclonales


Un anticuerpo monoclonal es un anticuerpo homogéneo producido por una célula hibrida producto de la fusión
de unclon de linfocitos B descendiente de una sola y única célula madre y un célula plasmática tumoral



Las células fusionadas (hibridomas)
producirán inmunoglobulinas idénticas a las que producía el plasmocito.



Obtenidos “inmortalizando” células plasmáticas por fusión con células de mieloma de ratón.

Anticuerpos monoclonales

Plasmocitos

Células de mieloma

Fusión

hibridomas

REACTIVOS...