Cosecha de celulas

COSECHA DE CELULAS
La cosecha de células es el primer paso para la recuperación de productos intracelulares. Primero se remueve el liquido extracelular, primero se remuevo el componente más abundante.
La filtración y centrifugación son las técnicas más utilizadas para la cosecha de células a gran escala. La centrifugación es más apropiada para los microorganismos grandes, y para organismospequeños se puede emplear técnicas de coagulación para aumentar el tamaño de las partículas. La filtración por membrana tiene ventajas para la cosecha de células pequeñas cuando el flujo es mayor que 20 l/m2 –h. la filtración por membrana es la que arroja mejores resultados. Otra ventaja de la filtración es que se pueden recuperar los productos ya que con la centrifugación se pierde alrededor del 5%de las células y con la filtración se recuperan todas las células siempre que no se presente lisis.
ROMPIMIENTO DE CELULAS: el segundo paso en la obtención de productos intracelulares es el rompimiento de célula. Para el rompimiento celular, también son utilizados métodos químicos. Como la digestión enzimática, la disolución lipidica así como el choque osmótico.
REMOSION DE DESECHOS CELULARES:cuando la célula rompe y el producto es librado los desechos son eliminados por una o varias operaciones como: centrifugación, micro filtración o filtración por presión, cuando el producto es soluble se recupera en parte de una centrifuga o en el filtrado de un filtro. Las centrifugas son muy eficientes en la separación de partículas. Cuando se usan microfiltros para remover los desechos esnecesario realizar un diafiltrado.
Cuando el producto es insolubre se debe ser separado primero de otras partículas y ser tratado para que adquiera su forma activa. Las partículas recombinantes son las que forman cuerpos de inclusión en la célula huésped y pueden ser separados de los restos celulares por medio de una centrifuga de discos. La purificación es realizada por suspensión y recentrifugacion dela fase pesada en 2 o 3 pasos.
La separación de productos de desechos también se puede hacer con solventes orgánicos o algunas soluciones de polímeros.
Los sistemas de dos fases acuosas sirven para la recuperación de proteínas. La concentración del producto de los deshechos puede ser alcanzada por medio de técnicas de extracción-adsorción ya sea utilizando adsorbentes de afinidad o deintercambio iónico. Posteriormente sigue un proceso de lavado en el cual muchos de los deshechos y contaminantes son eliminados.
ETAPAS DE RECUPERACION PRIMARIA: productos extracelulares
Eliminación de biomasa: es el primer paso que se realiza en un proceso de separación cuando el producto es extracelular, los equipos más empleados son la centrifuga decantadora, los filtros prensa y los filtros conmembranas cada uno con ventajas y desventajas según el tipo de célula.
Operaciones de alta resolución: una vez realizada la separación primaria del producto, la purificación se lleva a cabo mediante operaciones de alta resolución. Si el producto es soluble es necesario contraerlo. Si es insoluble y esta desnaturalizado primero se renaturaliza y luego se purifica.
Concentración: después de unaprimera clarificación del caldo obtenido del biorreactor o una ves rota la celula; el producto se encuentra diluido, para su concentración las operaciones alternativas son: ultrafiltración, extracción, osmosis inversa, evaporación, precipitación y destilación.
Ultrafiltración: es una operación que se usa ampliamente para proteínas.
Extracción: es una operación utilizada en la concentración deproductos biotecnológicos, particularmente en la obtención de antibióticos.
Osmosis inversa: se usan unidades con membranas de tamaño de poro pequeño para la concentración de soluciones de productos con bajo peso molecular.
Evaporación: se utilizan evaporadores de películas delgadas los cuales operan a temperaturas bajas al vacio.
Precipitación: es una operación usada para concentraciones y...