creatinina

INTRODUCCIÓN

La creatinina es una sustancia que se produce en el músculo a partir de fosfato de creatinina mediante deshidratación irreversible no enzimática y pérdida de fosfato. La excreción urinaria de creatinina en un periodo de 24 horas es proporcional a la masa muscular. Glicina, arginina y metionina participan en la biosíntesis de la creatinina. La síntesis de la creatinina termina conla metilación del guanidoacetato por medio de la S-adenosilmetionina. (Murray et al, 2004).

El hígado contiene un sistema enzimático llamado glutamato semialdehído que convierte irreversiblemente la ornitina en glutamato. La desaparición de ornitina por estas reacciones inhibe la síntesis de urea en el hígado por falta de ornitina, el intermediario del ciclo de la urea que se ha de reciclar. Larestitución de ornitina es necesaria y dependiente de una fuente de arginina sanguínea. Así, la síntesis de urea en el hígado depende de
la síntesis de citrulina por el intestino y de la síntesis de arginina por el riñón. Muchas células también utilizan arginina para la producción de óxido nítrico, un activador de la guanilato ciclasa que produce cGMP, un importante segundo mensajero. Lacitrulina participa en otra interesante lanzadera entre órganos. La arginina generada a partir de la citrulina en el riñón puede ser metabolizada posteriormente a creatinina. La primer enzima de esta ruta es la glicina transamidinasa (GTA), que genera acetato de guanidinio a partir de arginina y de glicina. La GTA se encuentra predominantemente en la corteza renal, el páncreas y el hígado. Pormetilación, en una reacción que requiere S-adenosilmetionina (SAM), se forma creatinina. (Devlin, 2004)





DISCUSION
A veces se requiere la desproteinizacion de una muestra. Esto se consigue fácilmente tratando el material biológico en este caso sangre con reactivos precipitantes de proteínas y centrifugando. Los dos reactivos mas utilizados en la desproteinizacion son el sulfato amoniaco y elacido tricloroacetico. También se utiliza a veces el tungstato sódico y el cloro de aluminio. La desproteinizacion es la remoción de proteínas de la sangre, suero o plasma para obtener un filtrado libre de proteínas y poder cuantificar la muestra sin interferencias para evitar la formación de espuma, turbidez, precipitado En esta práctica utilizamos la desproteinizacion de la muestra mediante unmétodo de metales pesados: Zn, Hg, Cd, Fe, Pb, etc. Se formara proteínas insolubles con las formas ionicas de las moléculas proteicas. Se producen enlaces de tipo salino entre los grupos carboxilo con carga negativa. También utilizamos el acido tricloroacetico que se utiliza cuando se necesita conservar sustancias inestables como acido ascórbico. Hay otros métodos para la desproteinizacion de unamuestra entre ellos hay métodos físicos: aquellos que cuando no alteran las proteínas que separa estos son el calor, la diálisis, la ultra centrifugación y la ultrafiltración. También hay métodos fisicoquímicos donde la proteína separan por precipitación, separándose luego por filtración o centrifugación, teniendo en cuanta la hidratación, la deshidratación, la deshidratación con solventes misciblescon el agua, deshidratación con soluciones salinas. También hay el método de los metales pesados y de ácidos

METODO OPERATIVO

PRECIPITACION DE PROTEINAS
Primero se realizó la desproteinización por el método de Folin-Wu. Para esto, secolocaron 2 mL de sangre oxalatada (con anticoagulante) en un tubo de prueba de 50mL. Se le adicionó 14 mL de agua destilada y 2 mL de tungstato 10%. Se agitóeltubo después de cada adición.
Posteriormente se agregó a la solución H2SO4 y se agitó nuevamente. Se observó un precipitado de color marrón chocolate. Luego se filtró a través de un papel filtrorápido. La muestra del líquido filtrado era incolora.

REACCION DE COLOR (REACCION DE JAFFE)
Se rotularon tres tubos de prueba como blanco, St, muestra; y se preparó una bateríade tubos de la...