Crecimiento bacteriano

Crecimiento Microbiano
I.- INTRODUCCIÓN
La célula bacteriana es esencialmente una maquinaria de síntesis capaz de duplicarse a sí misma. El proceso de síntesis para el crecimiento bacteriano involucra unas 2000 reacciones químicas de una amplia variedad. Una vez sintetizados los polímeros, el crecimiento continúa con el ensamblaje y formación de nuevas estructuras celulares que finalizan con ladivisión en dos células hijas. En un medio apropiado física y nutricionalmente, un cultivo se reproduce continuamente como células vegetativas, los nutrientes absorbidos y metabolizados permiten crecer al microorganismo.
II.- CONCEPTOS BÁSICOS
a) Crecimiento
Es definido como un incremento ordenado de todos los constituyentes y estructura celular. En muchos microorganismos, esteincremento continúa hasta que la célula se divide en dos nuevas células: Fisión binaria
El crecimiento microbiano conlleva usualmente a un incremento en el número de células. Es importante distinguir entre el crecimiento individual de células y el crecimiento de poblaciones de células:
Crecimiento individual
Es el incremento en el tamaño y peso y es usualmente un preludio a la divisióncelular
Crecimiento poblacional
Es el incremento en el número de células como una consecuencia del crecimiento y división celular
b) Tasa de crecimiento
Es el cambio del número de células o masa por unidad de tiempo
c) Generación
Intervalo para la formación de dos células provenientes de una.
d) Tiempo de generación
Tiempo que tarda una población enduplicarse. Se puede definir también como la cantidad de tiempo requerida para completar un ciclo de división.
Un experimento de crecimiento hipotético empezando con una simple célula, teniendo un tiempo de generación de 30´ se presenta en la siguiente tabla:
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III.- FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO
Factores externos
Condiciones ambientales o culturales: pH, T°, Aw, O2, CO2Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1, 12:1
Factores internos
Capacidad metabólica
IV.- MEDIDA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
Se mide por cambios sucesivos en el número de células o por el peso de la masa de las células. Existen varios métodos para contar las células o estimar la masa de éstas.
A) Recuento de células
1) Conteo de células al microscopio
Se emplea undispositivo graduado con 25 cuadrados cuyo volumen y área es conocido. Ej.: Cámara de Petroff-Hausser, cámara de Neubauer, hemocitómetro
Limitaciones: - Es muy tedioso, no es práctico para uun gran número de muestras
- No es muy sensible, se necesitan al menos 106 bact/ml para que sean observadas al microscopio
- No distinguen células vivas de muertas
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2) Conteode células viables
Una célula viable es definida como aquélla que es capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo. El conteo en placas es el método más utilizado. Pueden ser:
Diseminación en placa (siembra en placa por extensión).-
Se asume que cada colonia surgió de una simple célula, contando el número de colonias uno puede calcular el número de célulasviables en la muestra.
Método de vaciado en placa.-
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B) Medida de la masa celular
En muchos estudios es necesario determinar el peso de las células más que el número.
1) Peso seco
Se determina el peso seco o peso húmedo de una alícuota de la población separada por centrifugación. El peso seco es por lo general el 20-25 % del peso húmedo.
2) TurbidimetríaA través de un colorímetro o espectrofotómetro midiendo la turbidez en unidades de absorbancia. Debe prepararse curva estándar para cada organismo estudiado.
V.- CICLO DEL CRECIMIENTO POBLACIONAL
Si analizamos el crecimiento microbiano en el tiempo, éste describe una típica curva de crecimiento que puede ser dividida en fases distinguibles. La curva de crecimiento puede dividirse en...