Crecimiento En Bach
Páginas: 5 (1197 palabras)
Publicado: 25 de noviembre de 2012
Trabajo de laboratorio de Bioprocesos I Nº 1
“Nutrición Microbiana”
Alumnas: Villanueva Flavia, Denis Verónica, Naboulet Solange, Favaro Noelia
Profesor: Diego Baruque.
Instructora: Silvia Soto
Primer cuatrimestre del 2012
• Objetivo
Poner de manifiesto el efecto de los componentes del medio de cultivo sobre el crecimientocelular.
Introducción
En cultivos Batch, los microorganismos presentan un crecimiento que describe una gráfica de tres etapas, respondiendo a una cinética exponencial:
1) Una fase de latencia (fase lag), en la que prácticamente no hay división celular pero sí aumento de la masa individual de los microorganismos. Esta etapa ocurre como una adaptación metabólica de los microorganismos almedio de cultivo en el cual se inocularon, y su duración depende tanto de las condiciones previas a la inoculación y de cuán rico sea el medio fresco.
2) Un crecimiento exponencial, en el que los microorganismos se reproducen hasta agotar alguno de los nutrientes del medio. Es una etapa donde el crecimiento ocurre a velocidad específica (() máxima y constante = (máx*1. Al final de esta fase sealcanza la máxima concentración microbiana. Si se grafica como función logarítmica la cantidad de biomasa en función del tiempo, esta fase se presenta como una línea recta cuya pendiente es el parámetro (, que depende del pH, la temperatura, la fuerza osmótica, el sustrato, y del microorganismo.
3) Una fase estacionaria, la cual es causada por agotamiento de algún nutriente (el sustrato limitante).Los microorganismos detienen su crecimiento y la concentración microbiana (o de biomasa) permanece constante.
*1En cultivos Batch, el sustrato se encuentra en concentraciones mucho más grandes al Ks, por lo tanto, según la ecuación de Monod:
( =(máx . S/(Ks+S), y considerando S>>>Ks, la igualdad se convierte en ( =(máx.
Metodología
En base a la guía del trabajo práctico, se utilizóuna cepa de K. lactis en distintos medios de cultivo, haciendo un inóculo de 2ml. Se evaluó el crecimiento microbiano por densidad óptica a 600nm y pH en alícuotas tomadas cada 45 minutos aprox.
Composición de los medios:
1) Medio Referencia: Glucosa como fuente de carbono y energía (FCE), en una concentración de 4 g/L en un volumen de 100ml.
2) Concentración de FCE al 50% de la que había encomposición 1. ([Glu]=2g/L)
3) Medio sin fuente de nitrógeno (FN).
4) Medio de referencia con el agregado de extracto de levadura.
5) Medio de referencia en un volumen 3 veces mayor (300ml).
Cada cultivo fue rotulado con su respectiva letra desde A hasta E, pero ordenado azarosamente a fin de poder identificar a qué condición correspondía cada uno observando la curva de crecimiento.Resultados
Las alícuotas debieron ser diluidas a fin de entrar en el rango de mediciones de densidad óptica. Se obtuvieron resultados que, multiplicados por los factores de dilución, corresponden a los valores de:
|Tiempo (hs) |A |B |C |D |E |
|0 |1,184 |4,092|3,906 |3,894 |2,958 |
|0,45 |1,336 |3,576 |3,288 |4 |2,848 |
|0,90 |1,212 |3,84 |4,304 |4,008 |2,752 |
|1,35 |2,096 |5,45 |6,04 |4,4|2,99 |
|1,80 |2,208 |5,25 |6,435 |8,22 |2,75 |
|2,25 |0,795 |2,9 |5,97 |6,24 |2,4 |
Al graficar la densidad óptica (DO) en función del tiempo, se obtiene el siguiente gráfico:
[pic]
Gráfico...
“Nutrición Microbiana”
Alumnas: Villanueva Flavia, Denis Verónica, Naboulet Solange, Favaro Noelia
Profesor: Diego Baruque.
Instructora: Silvia Soto
Primer cuatrimestre del 2012
• Objetivo
Poner de manifiesto el efecto de los componentes del medio de cultivo sobre el crecimientocelular.
Introducción
En cultivos Batch, los microorganismos presentan un crecimiento que describe una gráfica de tres etapas, respondiendo a una cinética exponencial:
1) Una fase de latencia (fase lag), en la que prácticamente no hay división celular pero sí aumento de la masa individual de los microorganismos. Esta etapa ocurre como una adaptación metabólica de los microorganismos almedio de cultivo en el cual se inocularon, y su duración depende tanto de las condiciones previas a la inoculación y de cuán rico sea el medio fresco.
2) Un crecimiento exponencial, en el que los microorganismos se reproducen hasta agotar alguno de los nutrientes del medio. Es una etapa donde el crecimiento ocurre a velocidad específica (() máxima y constante = (máx*1. Al final de esta fase sealcanza la máxima concentración microbiana. Si se grafica como función logarítmica la cantidad de biomasa en función del tiempo, esta fase se presenta como una línea recta cuya pendiente es el parámetro (, que depende del pH, la temperatura, la fuerza osmótica, el sustrato, y del microorganismo.
3) Una fase estacionaria, la cual es causada por agotamiento de algún nutriente (el sustrato limitante).Los microorganismos detienen su crecimiento y la concentración microbiana (o de biomasa) permanece constante.
*1En cultivos Batch, el sustrato se encuentra en concentraciones mucho más grandes al Ks, por lo tanto, según la ecuación de Monod:
( =(máx . S/(Ks+S), y considerando S>>>Ks, la igualdad se convierte en ( =(máx.
Metodología
En base a la guía del trabajo práctico, se utilizóuna cepa de K. lactis en distintos medios de cultivo, haciendo un inóculo de 2ml. Se evaluó el crecimiento microbiano por densidad óptica a 600nm y pH en alícuotas tomadas cada 45 minutos aprox.
Composición de los medios:
1) Medio Referencia: Glucosa como fuente de carbono y energía (FCE), en una concentración de 4 g/L en un volumen de 100ml.
2) Concentración de FCE al 50% de la que había encomposición 1. ([Glu]=2g/L)
3) Medio sin fuente de nitrógeno (FN).
4) Medio de referencia con el agregado de extracto de levadura.
5) Medio de referencia en un volumen 3 veces mayor (300ml).
Cada cultivo fue rotulado con su respectiva letra desde A hasta E, pero ordenado azarosamente a fin de poder identificar a qué condición correspondía cada uno observando la curva de crecimiento.Resultados
Las alícuotas debieron ser diluidas a fin de entrar en el rango de mediciones de densidad óptica. Se obtuvieron resultados que, multiplicados por los factores de dilución, corresponden a los valores de:
|Tiempo (hs) |A |B |C |D |E |
|0 |1,184 |4,092|3,906 |3,894 |2,958 |
|0,45 |1,336 |3,576 |3,288 |4 |2,848 |
|0,90 |1,212 |3,84 |4,304 |4,008 |2,752 |
|1,35 |2,096 |5,45 |6,04 |4,4|2,99 |
|1,80 |2,208 |5,25 |6,435 |8,22 |2,75 |
|2,25 |0,795 |2,9 |5,97 |6,24 |2,4 |
Al graficar la densidad óptica (DO) en función del tiempo, se obtiene el siguiente gráfico:
[pic]
Gráfico...
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