criopreservacion

CONCEPTO DE CRIOPRESERVACIÓN Y CONCEPTOS RELACIONADOS
La criopreservación es el proceso en el cual células, tejidos, órganos o individuos completos son congelados
a muy bajas temperaturas, generalmente entre -80ºC y -196ºC (el punto de ebullición del nitrógeno líquido)
para disminuir las funciones vitales de una célula o un organismo y poderlo mantener en condiciones de vida
suspendida pormucho tiempo. A esas temperaturas, cualquier actividad biológica, incluidas las reacciones
bioquímicas que producirían la muerte de una célula, quedan efectivamente detenidas.
Normalmente para preservar una muestra biológica durante el mayor tiempo posible sin que pierda su calidad
se utiliza nitrógeno líquido. De esta manera sumergiendo la muestra en nitrógeno líquido se alcanzan
temperaturasde hasta -195,79ºC, la temperatura de ebullición del nitrógeno líquido. La utilización de helio
líquido permite alcanzar temperaturas incluso menores de hasta -268,93ºC (temperatura de ebullición del
helio). Las muestras criopreservadas en nitrógeno líquido sólo estarán afectadas por las radiaciones que
puedan incidir sobre ellas puesto que la congelación impide todo movimiento molecular en lamuestra.
Se ha realizado recientemente una revisión a la terminología empleada para los procesos criobiológicos
implicados en la vitrificación. Shaw y Jones, en 2003, establecieron claramente el significado en criobiología
de los términos congelación (freezing) y descongelación (thawing), y afirmaron que sólo podían usarse para
procedimientos donde se formaran o derritieran cristales de hielo(como s inónimo de deshielo o
derretimiento). Cooling y warming, cuyo significado en inglés es enfriamiento y calentamiento, sólo se refieren
a cambios de temperatura y pueden utilizarse indistintamente para la congelación tradicional y para la
vitrificación. El consenso actual entre los criobiólogos es usar los términos congelación -descongelación para
la congelación lenta y procesosrelacionados, y calentamiento-enfriamiento para la vitrificación, es decir,
términos vinculados con los cambios de temperatura y no de formación y derretimiento de cristales de hielo.
Con base en estos argumentos, se ha propuesto, como primer paso en la dirección correcta, reemplazar de
manera adecuada los términos en las etiquetas de los medios de vitrificación, como soluciones de
calentamiento(warming solutions) en lugar de soluciones de descongelación (thawing solutions).
• Slow freezing: criopreservación mediante formación de hielo en el medio extracelular. Es el método
tradicional utilizado para criopreservación de células aisladas. Se basa en velocidades lentas de enfriamiento,
al formarse hielo en el medio extracelular la célula se deshidrata mediante procesos osmóticos lo cual haceque aumente la concentración de sales en el interior de la célula. Este aumento de concentración pr ovoca lo
que se conoce como un descenso crioscópico, que consiste en una disminución del punto de congelación de
la célula. Esto permite un descenso de temperatura sin formación de hielo intracelular.
• Vitrificación: criopreservación sin formación de hielo intra o extracelular. Hay sistemas queen determinadas
condiciones responden a la disminución de temperatura con la formación de un sólido amorfo, en lugar de
formar una estructura cristalina como es el hielo en el caso del agua pura. La formación de este sólido, que se
conoce también como estado vítreo, evita la movilidad de las moléculas que provocan las reacciones
metabólicas, y con ello el envejecimiento o muerte celular.DESCRIPCIÓN DE ESTE PROCESO FÍSICO SOBRE SISTEMAS BIOLÓGICOS
Bastan dos principios físicos para explicar lo que le ocurre a la célula mientras se enfría: el principio de
ósmosis y el principio de descenso del punto de congelación.
El principio de ósmosis nos dice que cuando tenemos un saco (célula) semipermeable de este tipo sumergido
en otra disolución salina, entonces el agua empieza a fluir...