cromastografia

INTRODUCCIÓN
El botánico ruso mikhail tswett( mikhail semenovich tsett 1872-1919)- también conocido por su nombre latinizado, Tiselius- empleo por primera vez en 1906 el término “cromatografía” (del griego chroma y graphein que significan respectivamente “color” y “escribir”)
La cromatografía es una técnica de separación extraordinariamente versátil, que se aplica para laseparación, detección y cuantificación de una amplia variedad de sustancias coloreadas e incoloras como: gases, iones inorgánicos, azucares lípidos, drogas esteroides, proteínas, polisacáridos y otros.
La cromatografía se basa en el fraccionamiento de una muestra entre una fase móvil que puede ser un líquido o un gas y una fase estacionaria que puede ser un líquido o unsólido.


El método consiste en depositar la muestra a analizar o separar, en un lugar de la fase estacionaria (siembra o punteo), la fase estacionaria con la muestra se introduce en la fase móvil y los componentes de la muestra se distribuyen entre la fase estacionaria y la móvil.
Luego que las sustancias han sido separadas sobre la fase estacionaria, estas puedenser detectadas o visualizadas mediante reveladores, constituyendo el cromatograma.
I. FUNDAMENTO TEÓRICO

Los cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado clorofila. Sin embargo, lo que en realidad existe en los cloroplastos es una mezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila (clorofila a y clorofila b), por β caroteno ypor xantofila. Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad, lo cual permite su separación cuando una solución de la misma asciende por capilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro), ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que éste va ascendiendo. De esta forma, Al cabo decierto tiempo, A lo largo del papel de filtro se irán situando los distintos pigmentos en forma de bandas coloreadas, tanto más desplazadas cuanto más solubles sean los pigmentos a que pertenecen y tanto más anchas cuanto mayor sea la abundancia de estos en la mezcla

Tipos de cromatografíaSegún el fenómeno físico y según el estado físico de la fase que intervienen:
a) cromatografía de ADSORCIÓN Cuando la fase estacionaria es un sólido y la separación o desplazamiento de las sustancias depende del equilibrio de adsorción- desorción. Para que dos o más sustancias de una mescla se separen por cromatografía intervienen variosfactores: estructura química, solubilidad en el solvente, etc.
b) cromatografía de PARTICIÓN Si es un líquido que se encuentra soportado en un líquido inerte se trata de la cromatografía de participación. El soluto se reparte entre la fase móvil (líquido o gas) y la fase estacionaria.c) cromatografía de INTERCAMBIO IÓNICO Se lleva acabo con capas delgadas de columnas rellenas de resinas. Esta técnica depende del intercambio de iones entre la fase móvil y los iones de la fase estacionaria. La fase estacionaria es un sólido insoluble el cual puede intercambiar reversiblemente cationes y aniones con una solución. Una mezcla de iones es sorbida enla fase estacionaria y desarrollada con una fase móvil iónica, los iones son atraídos mediante fuerzas electrostáticas.
a) TÉCNICAS DE CROMATOGRAFÍA

a- Cromatografía plana: La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel las principales técnicas son:...