Cromatografía, PCR y otros conceptos

TIPOS DE CROMATOGRAFIA
Técnica utilizada para la separación de mezclas en la cual podemos observar tanto los componentes como las cantidades de estos.
Consiste en una fase estacionaria y una fase móvil. La estacionaria puede ser un sólido o un líquido anclado a un soporte solido que provoca la retención de los componentes de la mezcla; la fase móvil puede ser un líquido o un gas que provoca undesplazamiento sobre la fase estacionaria.
TIPO
CARACTERISTICAS
En papel
Produce únicamente análisis cualitativos. Se realiza sobre un papel de filtro y la fase móvil es un disolvente. La muestra es evaporada, y dependiendo del color de las muestras puede someterse a procesos de revelado.
En capa fina
Está compuesta de una fase estacionaria solida polar que puede ser vidrio, aluminio uotros; y una fase móvil liquida uniforme absorbente menos polar. La muestra se deposita en el borde inferior de la placa y sus componentes se separan ascendiendo a diferentes velocidades siendo los más rápidos, los menos polares. Se pueden visualizar los resultados con luz ultravioleta o con ayuda de un revelador.
Exclusión molecular
Separa moléculas o proteínas según su peso molecular.Contiene unas perlas con poros de tamaño calibrado que permiten el paso de ciertas moléculas y retienen otras.
Intercambio iónico
Permite la separación de iones y moléculas polares según su carga. Se utiliza para la purificación de proteínas o el análisis de agua. La fase estacionaria o resina de intercambio contiene grupos cargados que interactúan con iones del signo contrario en la fase móvil, queadquieren diferentes velocidades según su carga.
Por afinidad
Se utiliza para la separación de mezclas proteicas por su afinidad hacia un ligando que puede ser un anticuerpo, un inhibidor enzimático, un cofactor, entre otros. Provee alta selectividad en el mecanismo de retención.
De gases
Se utiliza para la utilización de compuestos orgánicos e inorgánicos térmicamente estables yvolátiles. La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido anclado sobre un sólido y la fase móvil es un gas que se inyecta en la columna.
Existen varios tipos de cromatografía dependiendo de sus fases o su procedimiento:


En columna
Se usa como fase estacionaria generalmente un gel de sílice o alúmina dentro de la columna, y pueden utilizarse diferentes disolventes dependiendo de la muestra; selibera la muestra separada por la parte inferior en tubos de ensayo. Este método funciona por adsorbancia.

PCR
Es una técnica utilizada para replicar pequeñas cantidades de DNA in vitro gran cantidad de veces. Las muestras para estas reacciones pueden venir de tan solo un cabello, una gota de sangre, una célula somática común o hasta un espermatozoide.
Es de gran utilidad en ciencias comola biología o la medicina y en el campo de la investigación debido a que arroja rápida y eficazmente bastante material genético de alta pureza, y este se utiliza para pruebas de paternidad, reconocimiento de personas desaparecidas, en el campo de la medicina legal, también permite identificar la presencia de algunos virus, o mutaciones genéticas en células cancerígenas, entre otros…
Puedeamplificar segmentos desde 50 hasta 2000 nucleótidos de longitud.
Consiste en 3 etapas principales: desnaturalización, apareamiento y extensión.
En la desnaturalización, se separan las 2 hebras de DNA mediante calentamiento, después, se disminuye la temperatura haciendo que las hebras molde se unan con las cadenas cortas de nucleótidos sintetizadas en el laboratorio que definirán el tramo que sereplicara; por último la DNA polimerasa extiende estas cadenas cortas en el pedazo restante entre ellas, y se repiten estos pasos en un efecto de cadena que duplicara a cantidad de segmentos en cada ciclo.



GEN BANK
Es la base de datos de secuencias de DNA del instituto de salud nacional de Estados Unidos, siendo una colección de disponibilidad pública que hace parte de la International...