cromatografía por intercambio iónico

FUNDAMENTO:
Las separaciones por intercambio iónico, se lleva a cabo con materiales insolubles y de textura porosa, los cuales presentan grupos reactivos asociados a iones lábiles capaces deintercambiarse con los del medio que les rodea, por lo que inevitablemente este tipo de cromatografía ha de realizarse en medio liquido. La cromatografía de intercambio iónico, es utilizable para laseparación de sustancias iónicas, tanto inorgánicas como orgánicas. Las separaciones por cambio iónico, están basadas en los diferentes equilibrios de reparto de los iones de la mezcla entre el materialcambiador y la disolución.
OBJETIVOS:
 Emplear la técnica de intercambio iónico para la separación de dos aminoácidos.
 Comprobar la separación mediante una reacción colorida y el perfil de elución.RESULTADOS:
Tabla No.1: Separación de Prolina o Histidina.
Volumen de elución (mL) A400 A570 Volumen de elución (mL) A400 A570
3 0.098 63 0.085
6 0.051 66 0.115
9 0.076 69 0.095
12 0.06172 0.021
15 0.025 75 0.056
18 0.127 78 0.012
21 0.433 81 0.091
24 0.611 84 0.065
27 0.650 87 0.267
30 0.558 90 0.026
33 0.417 93 0.326
36 0.387 96 0.319
39 0.315 99 0.16842 0.294 102 0.269
45 0.348 105 0.122
48 0.164 108 0.125
51 0.175 111 -0.010
54 0.121 114 -0.007
57 0.075 117 -0.043
60 0.040 120 -0.056





Gráfica No.1: Perfil de eluciónpara la separación de Prolina e Histidina.


DISCUSIÓN:
A partir de la cromatografía por intercambio iónico se logró separar dos aminoácidos (prolina e histidina), al poseer grupos amino quepueden estar o no protonados y tener grupos carboxilato del mismo modo, protonado con carácter ácido o como carboxilato se pudo establecer un sistema de fases móviles en el lecho cromatográfico quepropiciaron la separación de estos aminoácidos.
El aminoácido que eluyó primero fue la prolina debido a que al adicionar el regular de citratos con un pH= 5.25, la histidina se protona más, por lo que...