Cromatografía Reconocimiento De Aminoácidos- Test De Ninhidrina

UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA” DE ICA
FACULTAD CIENCIAS-EAP BIOLOGÍA

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Autores:Magallanes Neyra, César
Peláez Huamán, Angie
Sandoval Junes, Juan
CROMATOGRAFÍA
RECONOCIMIENTO DE AMINOÁCIDOS- TEST
DE NINHIDRINA
Objetivos de la práctica:
* Aprender correctamente la técnica decromatografía* de papel
* Reconocer los aminoácidos presentes en una solución
* Comprender el fundamento de la reacción de Ninhidrina
Materiales:
* Fase móvil (dada por la cámaracromatográfica):
* Cloroformo 4= 32ml
* Metanol 4= 32ml
* Hidróxido de amonio 1= 08ml
* Fase estacionaria(cromatograma): papel WATHMAN
* Aminoácidos 5mgdiluído en 10 ml de agua destilada
* Ninhidrina al 0.5%
* Placa o tapa de vidrio
* Estufa
* Micropipetas
* Secadora
* Pinzas
* tijeras

PROCEDIMIENTO:
1. Se realizanlas medidas correspondientes en el papel WATHMAN

2. Se le adicionan los aminoácidos (3ml) en el correspondiente lugar y para nuestro mejor proceso después de cada gota que se adicionaba sesecaba con la secadora de mano pues en este procedimiento se tiene que cuidar de que los 3ml no se expanda demasiado del punto donde se coloca: x/2

Para la manipulación del papel WATHMAN se tuvo queusar guantes estériles para no alterar el recorrido de la fase móvil a través del papel.
3. Se introduce en la cámara cromatográfica por 30 min. La parte anterior se fija con una cinta adhesiva a latapa de vidrio del frasco que contiene Fm; la parte posterior la solución tiene que llegar al borde de la 2da línea y además el papel no debe chocar las paredes

4. Pasado los 30 min se retiracon cuidado y se le agrega solución de Ninhidrina al 0,5%

5. Se procede a ponerla en la estufa a 60° por 20 min

6. Se observan los resultados

VAL
Rf2= 6.5/11.5
Rf2= 0.6
ALA...