Cromatografía

OBSERVACIONES
Experiencia 1 Separación de carotenos
* Primero introducimos un pedazo de algodón a una columna cuidando de que no quedara muy ajustado.
* Preparamos la sílice gel con 4 g de ésta, y una mezcla de hexano con acetato de etilo 1:1 y la colocamos en la columna, pero no se fue completa y tuvimos que agregar más mezcla, sólo que goteaba más rápido y casi se nos secaba.
* Yaagregamos el sulfato de sodio anhidro, y colocamos el papel filtro. Dejamos gotear el disolvente.
* Posteriormente, en el momento que el disolvente estaba a 1 cm aproximadamente de la sílice, adicionamos el concentrado de espinacas en la columna y mantener el goteo hasta que los pigmentos penetren el sílice, una vez hecho eso, llenamos la columna con disolvente y comenzó la cromatografía.* Cuando notamos que quedó un color amarillo en la sílice que no desapareció, cambiamos de fase móvil a metanol-acetato de etilo 1:1 y terminó de eluir
Experiencia 2 Separación de licopenos
* Esta no la realizamos, debido a que debíamos salir temprano.
Experiencia 3 Separación por cromatografía en placa fina de una mezcla de colorantes
* En la cromatoplaca dibujamos una línea con lápizy ahí marcamos los tres puntos de muestra, que fueron el concentrado de espinacas, la primera fracción de la cromatografía hecha en columna, así como la de extracción de licopenos. Dejamos secar y lo colocamos en una cámara cromatográfica.

RESULTADOS

Tabla1-. Propiedades de reactivos utilizados en la práctica
PROPIEDADES DE LOS REACTVOS |
Disolvente | Formulaquímica | Punto de Ebullición | Constante dieléctrica |
Metanol | CH3-OH | 65 °C | 33 |
Etanol | CH3-CH2-OH | 79 °C | 24 |
Acetato de etilo | CH3-C(=O)-O-CH2-CH3 | 77 °C | 6,0 |
Hexano | CH3-CH2-CH2-CH2-CH2-CH3 | 69 °C | 2,0 |
*La polaridad va de forma descendente
1° Fase móvil
Hexano: Acetato de etilo 1:1

Cromatografía por columna

Fracciones
(Grado de separación)

2° Fase móvilAcetato de etilo: metanol 1:1

Cromatografía por capa fina

ANALISIS DE RESULTADOS
En cromatografía por columna, la primera fase móvil que se utilizo fue la mezcla de hexano: Acetato de etilo 1:1 que conforme a nuestra tabla 1 podemos decir que era una fase no polar por lo que al hacerla pasar por la columna, eluyeron las sustancias no polares (componentes no polares de los carotenos),mientras que las moléculas de los componentes polares quedaron adheridas a la matriz de la columna, es decir a la sílica-gel; al cambiar de fase y utilizar la mezcla a acetato de etilo: metanol 1:1 que posee mayor polaridad, las moléculas polares que se quedaron adheridas en la matriz se fueron moviendo al remplazar su interacción con la sílica-gel por la interacción con la mezcla de acetato deetilo: metanol 1:1. Y así se pudo obtener una mayor separación, recolectando fracciones coloridas, las cuales indicaban el grado de separación
Con respecto a la cromatografía por capa fina, se puede decir que se utilizaron diferentes fases móviles, para poder apreciar la separación de los componentes de los licopenos y los carotenos. Se puede comparar con respecto a nuestras imagines que algunasfases móviles fueron mas efectivas para la separación de los licopenos, y otras mas efectivas para los carotenos. La primera fase que se utilizo, fue la mezcla de acetato de etilo: metano: hexano 1:1:1, en la cual no hubo ninguna separación de componentes de nuestros extractos por lo que nuestro equipo no pudo calcular la relación de frentes. Como sabemos la separación se da por migración diferencial,es decir que la fase móvil arrastra a las substancias apolares y aquellas más polares son retenidas por la fase estacionaria dando lugar a la separación. Sin embargo al hacer otra fase móvil, la mezcla de acetato de etilo: etanol: metanol 2:2:1 los componentes de los carotenos y licopenos se comenzaban a separar mejor que en la primera fase que se utilizo; al utilizarse otra fase, mezcla de...