Cromatografía


Objetivos:
1.-Conocer el concepto de cromatografía y saber para que la podemos utilizar.
2.- Comprender y manejar los métodos para realizar una cromatografía, así como saber cuándo podemos utilizar cada uno de ellos.
*Introducción:
La cromatografía comprende un conjunto de técnicas que tienen como finalidad la separación de mezclas basándose en la diferente capacidad de interacción decada componente en otra sustancia. De forma general, consiste en pasar una fase móvil (una muestra constituida por una mezcla que contiene el compuesto deseado en el disolvente) a través de una fase estacionaria fija sólida. La separación de los diferentes componentes de una mezcla que se encuentran en un líquido o gas es el resultado de las diferentes interacciones de los solutos a medida que sedesplazan alrededor o sobre una sustancia líquida o sólida (la fase estacionaria). Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen: cromatografía de líquidos, cromatografía de gases y cromatografía de fluidos supercríticos.
-Cromatografía de adsorción: Diferente afinidad de adsorción de los componentes de la muestra sobre la superficie de un sólido activo. La adsorción es la capacidad delas superficies para fijar moléculas. La F.E. es siempre sólida. Ejemplos: alúmina, gel de sílice, carbón activo, fosfato cálcico, hidroxiapatito, etc.
-Cromatografía de reparto: Diferente solubilidad de los componentes de la muestra en la fase estacionaria (caso de la cromatografía de gases), o diferentes solubilidades de los componentes en las fases móvil y estacionaria (caso de la cromatografíalíquida). Ejemplos: en cromatografía plana, la F.E. es el agua o disolvente asociados a la celulosa (papel) o al soporte sólido que forma la capa fina; en columna, como F.E. se usan tierra de diatomeas, gel de sílice, celulosa en polvo, etc.
CROMATOGRAFÍA EN PLACA FINA
La cromatografía en capa fina es una técnica analítica rápida y sencilla, muy utilizada en un laboratorio de Química Orgánica.Permite:
- Determinar el grado de pureza de un compuesto.
- Comparar muestras.
- Realizar el seguimiento de una reacción.
¿Cómo se hace?
La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lámina de plástico o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase estacionaria). Entonces, la lámina se coloca en un frasco cerrado que contiene uno ovarios disolventes mezclados (eluyente o fase móvil). A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.
Factores que influyen en una separación por cromatografía de capa fina. 
En caso de que los compuestos son coloreados se pueden observar lasmanchas a simple vista. Si no es así, hay varios métodos para visualizar las manchas correspondientes a cada componente de la mezcla. Utilizar luz ultravioleta (UV254) para observar la placa. Normalmente se adiciona un colorante fluorescente al adsorbente, de forma que la placa sea fluorescente en todas partes excepto donde haya una mancha correspondiente a un compuesto orgánico.
Utilizar reveladores,por ejemplo, vapores de yodo que es un reactivo inespecífico.
Emplear reactivos específicos para desarrollar coloración en las manchas. Esto se puede hacer sumergiendo la placa de CCF.

Adsorbentes y eluyentes
Los dos adsorbentes más utilizados son la gel de sílice (SiO2) y la alúmina (Al2O3), ambas de carácter polar. La alúmina anhidra es el que retiene con más fuerza a los compuestos; porello se utiliza para separar compuestos relativamente apolares. El gel de sílice, se utiliza para separar sustancias más polares.
El adsorbente debe ser inerte con las sustancias a analizar y no actuar como catalizador en reacciones de descomposición.








La adsorción de una sustancia es su acumulación en una determinada superficie interfacial entre dos fases. El resultado es la...