cromatografia de capa fina

CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA Y COLUMNA


RESUMEN
Las técnicas cromatográficas se emplean para separar los componentes individuales de una mezcla y, enciertos casos, para identificar un compuesto comparando su comportamiento cromatográfico con el desustancias conocidas empleadas como patrón,La primera técnica es La cromatografiade capa fina (CCF), TLC en donde La fase estacionaria es una capauniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte, Y la segunda Cromatografía en columna Se emplea para la separación de mezclas o purificación de sustancias a escala preparativa. Como fase estacionaria se usa, generalmente, gel de sílice o alúmina dentro de una columna, La elección del disolvente es crucial para una buena separación.Dicho disolvente pasa a través de la columna por efecto de la gravedad o bien por aplicación de presión (cromatografía flash).

PALABRAS CLAVES

Cromatografía, disolvente, polar, apolar, orgánico.

ABSTRACT

Chromatographic techniques are used to separate individual components of a mixture and, in certain cases, to identify a compound by comparing its chromatographic behavior with knowndesustancias used as a standard technique is the first layer chromatography (TLC), TLC on the stationary phase which is a uniform layer of absorbent maintained on a plate, which may be glass, aluminum or other support, and the second column chromatography was used for purification or separation of mixtures of substances on a preparative scale. Is used as the stationary phase, generally alumina orsilica gel in a column,the choice of solvent is critical for good separation. Said solvent passing through the column by gravity or by applying pressure (flash chromatography).


KEYWORDS

  Chromatography,solvent, polar, nonpolar, organic.





CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA

La cromatografía de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar moléculas relativamente pequeñas. Enla biología celular se utiliza frecuentemente para separar azúcares simples, lípidos, aminoácidos, nucleótidos, metabolitos, y ocacionalmente para separar cadenas cortas de polipéptidos y ácidos nucleicos. Al igual que otras cromatografías, consiste de una fase estacionaria y una fase móvil y el principio es el mismo: la sustancia de interés se adherirá a la fase estacionaria o se moverá con lafase móvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria.
La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie sólida (una placa de vidrio, aluminio, plástico o papel). Esta superficie sólida puede ser rígida o flexible. El tipo de fase estacionaria que seutilice en un experimento dependerá del tipo de moléculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgánico o una mezcla de ambos.
El procedimiento es sencillo: Se colocan las muestras a un centímetro del borde en uno de los extremos de la placa, se deja secar, se coloca la placaen un envase (tanque de desarrollo) que ya contiene una pequeña cantidad del solvente, se tapa y se deja correr por un rato. El solvente subirá por capilaridad e irá arrastrando las moléculas, las cuales se moverán según la afinidad que muestren por la fase estacionaria. Si la mezcla de muestras que se está analizando presenta color, se verán los distintos colores migrando a distintas velocidades.Si son incoloras hay que someter la placa a algún tratamiento con una sustancia desarrolladora (developer) para poder determinar la presencia de sustancias sobre el silicato. El tipo de desarrollador dependerá del tipo de moléculas que se analizan.

Materiales para la técnica de capa fina:

disolvente orgánico (acetona)
Producto solido
Micropipetas
Microjeringuillas
tubos capilares...