CROMATOGRAFIA Ej

PRACTICA #6:
CROMATOGRAFIA EN CAPA
FINA & COMLUMNA

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HISTORIA

• Desarrollada por Mikhail Tswett, en 1906 con el fin de
separar los colorantes que componen a las plantas.
• Consistía en una columna de vidrio rellena de CaCO3 a la
cuál se le colocaba la muestra en la parte superior y se le
circulaba éter de etilo, logrando que las sustancias más
afines al solvente salieran de la columna másrápidamente
que las menos afines.

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ANTECEDENTES

 
Es un método de separación y análisis de mezclas,
basado en las diferentes velocidades a la que
distintos compuestos se separan de una fase
estacionaria por medio de una fase móvil.
 
Es el método utilizado para separar cantidades
pequeñas de material en trabajos a escala de
laboratorio donde se usan con más frecuencia.
 
Las diferentescapacidades de las sustancias de
adherirse a las superficies también se pueden
utilizar para separar mezclas. Esta capacidad es la
base de la cromatografía (que literalmente significa
“la estructura de los colores”).

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TEORÍA
La cromatografía es esencialmente un método físico de separación en el que
los componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una inmóvil (lecho
estacionario), y otra móvil(fase móvil) la cual percola atreves de la primera. El
proceso cromatográfico de sorción-desorción durante el movimiento de los
componentes de la mezcla arrastrados por la fase móvil a lo largo del lecho
estacionario (elución), produciéndose la separación debido a la diferencias en
las constantes de distribución de los componentes de la mezcla entre la fase
estacionaria y la fase móvil. A ladistribución final de los componentes en
función de su composición sobre el lecho estacionario, o del tiempo en el que
eluyen se le denomina cromatograma.
 
 

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CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE
SEPARACIÓN EN CROMATOGRAFÍA
Las distintas técnicas cromatografías se pueden dividir según cómo
esté dispuesta la fase estacionaria:
Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa
plana osobre un papel. Las principales técnicas son:
1. Cromatografía en papel
2. Cromatografía en capa fina
Cromatografía en columna. La fase estacionaria se sitúa dentro de
una columna. Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:
3. Cromatografía de líquidos
4. Cromatografía de gases
5. Cromatografía de fluidos supercríticos

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Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividirsegún
cómo esté dispuesta la fase estacionaria:

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CROMATOGRAFÍA EN PAPEL

En la cromatografía sobre papel, las interacciones del soluto con el papel
hacen que los compuestos se desplacen a velocidades diferentes.
Una pequeña mancha de disolución que contiene la muestra se aplica sobre
una tira de papel cromatográfico a una distancia aproximada de un
centímetro de la base. La muestra es adsorbida enel papel. El papel es
sumergido en un disolvente adecuado (etanol o agua) e introducido en un
contenedor cerrado. A medida que el disolvente asciende por el papel,
encuentra la muestra que empieza a viajar por el papel con el disolvente.
Los diferentes compuestos de la muestra recorren distancias diferentes
dependiendo de la fuerza de sus interacciones químicas con el papel. La
cromatografía enpapel requiere algún tiempo, habitualmente se necesitan
varias horas para completarse.

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El cromatograma final puede ser comparado con otros de
mezclas conocidas a fin de identificar los componentes de la
muestra. La cromatografía en papel de dos dimensiones
consiste en desarrollar el cromatograma en un disolvente, girar
el papel 90º y desarrollar el cromatograma en un disolvente
diferente. Esútil para separar mezclas complejas de
compuestos similares.

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CROMATOGRAFÍA EN CAPA
FINA
En la cromatografía en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste
en una capa delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de
sílica, alúmina o celulosa) depositada sobre un soporte plano como
una placa de vidrio, o una lámina de aluminio o de plástico.
La CCF es una técnica analítica y tiene como...