cromatografia en capa delgada

UNIVERSIDAD DE MORÓN
Química Biológica

TP Nº 1
Cromatografía en Capa Delgada



Comisión 1 - Grupo: A –Equipo 9
Alumnos:
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* Práctica fecha: 10/4/13






Objetivo:
Conocimiento y desarrollo dela cromatografía en placa delgada (TLC) y de los distintos tipos de revelado. Determinación en los componentes de una muestra incógnita.

a) Cromatografía con revelado físico
Introducción:
Secromatografían hormonas esteroideas (progesterona y corticosterona) y se revelarán sus posiciones por exposición a la luz UV, que es absorbida por estos compuestos. Los dobles enlaces conjugados presentes enla fórmulas de ambas son responsables de la absorción de la luz UV.
Las placas utilizadas son de silica gel y la fase móvil consiste en Benceno:Acetato de etilo (2:1).
PROGESTERONA: es una hormonaesteroide en el ciclo menstrual femenino, embarazo (promueve la gestación) y embriogénesis de los humanos y otras especies. Es la responsable del desarrollo de caracteres sexuales secundarios en lamujer, y sirve para mantener el embarazo.

CORTICOSTERONA: Constituye un precursor de la aldosterona, involucrándose en la regulación del metabolismo, las reacciones inmunológicas y las respuestas deestrés.



Desarrollo:
Siembra:
Progesterona (P4)
Corticosterona (B)
Muestra incógnita corrida: TUBO II (M)

Cromatograma obtenido:










Cálculo de Rf y Platos teóricos para cada hormona:


Rf =Distancia recorrida por la sustancia / Distancia recorrida por la fase móvil

Nº Platos Teóricos = 16 (d/w)2


Distancia recorrida (mm)
Ancho de la mancha
(mm)
Rf
Platos teóricos
Fase móvil
35



P415
3
0,42
400
B
5
2
0,14
100
M
5
2
0,14
100


Determinación de la muestra:

Por comparación de Rf con los estándares, se puede determinar que la muestra sembrada (M) contenía la hormona Corticosterona.Conclusiones:

Utilizando el principio de la cromatografía, y en este caso del revelado físico, fue posible separar los componentes de una mezcla de hormonoes, y determinar la composición de...