Cromatografia En Capa Fina De Los Azucares

República Bolivariana de Venezuela
Ministerio del poder popular para la educación Universitaria
Instituto Universitario de Tecnología Cumaná
Cumaná – Estado Sucre

Cromatografía de capa fina de los azúcares

Cumaná, junio del 2012

Introducción
La cromatografía de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar moléculas relativamente pequeñas. Al igual que otrascromatografías, consiste de una fase estacionaria y una fase móvil y el principio es el mismo: la sustancia de interés se adherirá a la fase estacionaria o se moverá con la fase móvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. Esta se basa en la preparación de una capa, uniforme, de un adsorbente mantenido sobre una placa de vidrio u otro soporte. Losrequisitos esenciales son, pues, un adsorbente, placas de vidrio, un dispositivo que mantenga las placas durante la extensión, otro para aplicar la capa de adsorbente, y una cámara en la que se desarrollen las placas cubiertas. Es preciso también poder guardar con facilidad las placas preparadas y una estufa para activarlas.
La fase móvil es líquida y la fase estacionaria consiste en unsólido. La fase estacionaria será un componente polar y el eluyente será por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad serán los menos polares.
La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de expresar la posición de un compuesto sobre una placa como una fracción decimal, mide la retención de un componente. Sedefine como:

Objetivos
* Identificar una muestra de azúcar contenida en una muestra problema, utilizando la técnica de cromatografía de capa fina.

Materiales y reactivos
* Silica gel para cromatografía de capa fina.
* Solución de Bisulfato de sodio 0,05M
* Soluciones azucaradas al 2%
* Solución timol – H2SOSoluciones azucaradas al 2%
* Solución timol – H2SO
0,5gtimol + 5ml H2SO4. Completar a 100ml con etanol al 96%
* 2-propanol
* Tolueno
* Acetato de etilo
* Cuba
* Placa
* Micropipeta o capilar
* Cilindro graduado
* Pulverizador
* Equipo para cromatografía de capa fina
* Regla especial para depósitos
* Regla normal para medir el recorrido

Resultados

Tabla 1: Resultados de las medidas recorridas por lasmuestras
Muestras | Distancias recorrida (cm) |
Glucosa | 4,3 |
Galactosa | 2,8 |
Sacarosa | 5,5 |
Fructosa | 3,5 |
Lactosa | 5,5 |
Muestra Desconocida | 4,0 |

* El solvente recorrió una distancia de 13,0cm.

Discusión
Para realizar el proceso de cromatografía en capa fina se empleó una fase estacionaria solida pulverizada, como una fina cubierta sobre una superficie lisa desoporte firme (vidrio). Esta fase solida (silicia gel) funciona como agente adsorbente de los siguientes azucares: Glucosa, galactosa, sacarosa, fructosa, lactosa y una muestra desconocida. Para observar el recorrido de los azucares la placa con las soluciones fue introducida dentro de una cuba la cual contenía en su interior una mezcla de: 2-Propanol, tolueno, acetato de etilo y agua. Pasado unperiodo de tiempo de aproximadamente 1 hora, las fases liquidas empezaron a migrar a distinta velocidad, una vez culminado este proceso se precedió a marcar con una regla la distancia recorrida por el solvente en la placa este alcanzo una altura de 13cm. De igual manera se midieron las distancias recorridas por los compuestos sus distancias recorridas fueron: Glucosa 4,3, Galactosa 2,8, Sacarosa 5,5,Fructosa 3,5, Lactosa 5,5, Muestra Desconocida 4,0. Con estos valores se calculó el Rf, que es la distancia recorrida por un compuesto entre la distancia recorrida por el solvente. Este cálculo se hizo para determinar el tipo de azúcar que estaba contenida en la muestra desconocida. Luego de haber realizado todos los cálculos se pudo observar que el valor Rf de la muestra desconocida es mucho...