Cromatografia En Capa Fina Y En Columna

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y EN COLUMNA
OBJETIVOS

1. El alumno conocerá la técnica de cromatografía en capa fina (ccf) y en columna, sus características y los factores que en ella intervienen

2. Demostrará que la cromatografía constituye una técnica valiosa para separar mezclas de compuestos, efectuar purificaciones, determinar homogeneidad (pureza) de sustancias químicas y suidentificación así como su control en producción técnica.

INVESTIGACIÓN PREVIA

1. Concepto de cromatografía. Tipos de cromatografía. Cromatografía de adsorción y cromatografía de partición. Ejemplos.

La cromatografía es un método empleado para la separación, identificación y determinación de los componentes químicos de mezclas complejas. Ningún otro método de separación es tan poderoso ni tienetantas aplicaciones como la cromatografía. Se aplica en una gran variedad de sistemas y técnicas, sin embargo, todos estos métodos tienen en común el empleo de una fase estacionaria y una fase móvil. Los componentes de una mezcla pasan a través de una fase estacionaria mediante el flujo de una fase móvil y las separaciones están basadas en las diferencias en la velocidad de migración entre loscomponentes de la fase móvil.

Tipos de cromatografías:
Si es un sólido
Cromatografía de adsorción: El sólido adsorbe al componente que inicialmente estaba en fase móvil (liquida o gaseosa) (Fuerzas de Van der Waals)
Cromatografía de cambio iónico: el sólido es un cambiador de iones (fuerzas electrostáticas)
Cromatografía de exclusión (o de geles), el sólido es un gel formado por polímeros noiónicos porosos que retienen a las moléculas de soluto según su tamaño.

Cromatografía de afinidad: es un tipo especial de cromatografía de adsorción, utilizada especialmente en bioquímica, en la que un sólido tiene enlazado un llamado ligando de afinidad que puede ser por ejemplo, un indicador enzimático o un anticuerpo.

Si es un líquido
Cromatografía de partición. El soluto se reparte entrala fase móvil (liquido o gas) y la fase estacionario.

2. Fenómeno de adsorción. La propiedad de retención. Concepto de Rf
La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de expresar la posición de un compuesto sobre una placa como una fracción decimal, mide la retención de un componente. Se define como:

La distancia recorrida por el compuesto se mide generalmente desde elcentro de la mancha, los cálculos se simplifican si el denominador es 10. Para que los RF sean reproducibles deben ser fijadas una serie de condiciones (Espesor de la placa, fase móvil, fase estacionaria, cantidad de muestra). El máximo valor de RF que se puede alcanzar es de 1, lo ideal es un RF entre 0.65 y 0.7.
También se puede operar de la manera siguiente: Se selecciona un compuesto (X), quetenga una posición de desarrollo conveniente; todos los demás compuestos sobre la placa se relacionan con éste. De esta manera se tiene el, RX , ya que:



3. La cromatografía en capa fina. Sus características y aplicaciones.
La cromatografía en capa fina se basa en la preparación de una capa uniforme, de un adsorbente mantenido sobre una placa de vidrio u otro soporte. Los requisitosesenciales son, pues, un adsorbente, placas de vidrio, un dispositivo que mantenga las placas durante la extensión, otro para aplicar la capa de adsorbente, y una cámara en la que se desarrollen las placas cubiertas.
La fase móvil es líquida y la fase estacionaria consiste en un sólido. La fase estacionaria será un componente polar y el eluyente será por lo general menos polar que la fase estacionaria,de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad serán los menos polares.
4. Eluyentes, soportes y reveladores más comunes para cromatografía en capa fina.
- éter de petróleo - cloruro de metileno
- n-hexano - acetato de etilo
- ciclohexano - acetona
- tolueno - iso-propanol
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