Cromatografia en capa fina

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA



OBJETIVOS


El alumno comprendera el principio de la cromatografía y utilizara sus diversas posibilidades para la purificación e indentificación de compuestos orgánicos.

Calcular valores de r.f. de varias sustancias y correlacionarlo a la selección adecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la polaridad de las
sustancias que se analizany la de los eluyentes utilizados.

ANTECEDENTES

a) Concepto de cromatografía. Tipos de cromatografía
b) La cromatografía en capa fina. Sus características y aplicaciones.
c) Eluyentes, soportes y reveladores más comunes para cromatografía en capa fina.
d) Factores que influyen en una separación por cromatografía de capa fina.

INFORMACIÓN

• Concepto de cromatografía

Lacromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o mas compuestos por distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fase móvil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: sólido-liquido (capa fina, papel o columna), liquido-liquido y gases-liquido ( fase vapor ).

Todas las técnicascromatográficas dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido.

Todos los sólidos finamente pulverizados tienenel poder de adsorber en mayor o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente, todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía.

• Concepto de R.F.

Rf es el registro y se define como:
Rf = distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicación /distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente

El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra (tipo de adsorbente, eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturación, etc.). Tiene una reproducibilidad de ± 20%, por lo que es mejor correr duplicados de la misma placa.

• Cromatografía en capa fina.

En este casose utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeño espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascenderá, por capilaridad, por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de ésta produciendo “manchas” de los componentes. Se usan láminas de: vidrio como soporte del adsorbente, plástico (ej: acetato) ó metálicos (ej: aluminio). Los tamaños de la placa paraCCf convencional son: 20 x 20; 10 x 20 y 5 x 2.

Hay placas que contienen un indicador de fluorescencia, para facilitar la identificación de requerirán técnicas de revelado.

• Eluyentes más comunes para cromatografía en capa fina.

-éter de petróleo
-tolueno
-dietil-éter, t-butil-éter
-diclorometano
-acetato de etilo
-n-pentano, n-hexano
-ciclohexano
-tetracloruro de carbono
-éterdietílico
-cloroformo
-acetona
-iso-propanol
-etanol
-metanol
-ácido acético

Reveladores mas comunes para cromatografía en capa fina

Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarse mediante:

• Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F254 ó F366),el número que aparece como subíndice nos indica la longitud de onda de excitación del indicador utilizado.

• La introducción de la placa en vapores de yodo.
• El rocío con una solución de agua/H2SO4 1:1 (dentro de un compartimiento especialmente protegido y bajo una campana de extracción de gases).
• Después calentar intensamente, por ejemplo, con un mechero hasta carbonizar los compuestos....