Cromatografia en capa fina
Objectiu
Separar i identificar els diferents aminoàcids d’una mostra utilitzant la tècnica de la cromatografia en capa fina (CCF).
Calcular l’Rf dels diferents aminoàcids patrons i també elde les diferents taques de la mostra problema.
Determinar la composició de la mescla analitzada (la mostra problema) gràcies als valors de Rf obtinguts.
Estudiar i cercar els diferents tipus decromatografia existents i perquè els aminoàcids tenen diferents Rf
Dades experimentals
Fase móvil: n-butanol:àcid acètic glacial:aigua (3:1:1)Imatge digitalitzada on observem dreta a esquerra:
La mostra problemaM,
Lysina LI,
LeucinaLE,
GlicinaG,
Alanina A
Càlculs i resultats
Càlcul del factor de retenció Rfdels patrons
LI
Rf = =0.119
A
Rf = =0.380
LE
Rf = =0.598
G
Rf = =0.304
Càlcul del factor de retenció Rf de la mostra problema (M)
LI
Rf = =0.0.136
ARf = =0.391
LE
No ha sortit detectada per la mostra problema
G
Rf = =0.239
Qüestions
1) Descriu la reacció de la ninhidrina amb els aminoàcids i els colorsobtinguts
La ninhidrina (hidrat de tricetohidrindeno) reacciona amb aminoàcids que tinguin el grup amino lliure, donant lloc a la formació d'amoníac i anhídrid carbònic, amb reducció del reactiu(ninhidrina) a hidrindantina
La hidrindantina reacciona amb l’amoníac i també amb una altra molècula de ninhidrina, per tal de donar un compost d'addicció doble que presenta una coloracióblava-púrpura ( púrpura Ruhemann).
La reacció de ninhidrina amb amines secundaries d’una sal d'imini, dóna una coloració groga-taronja.
L-Lysina
Alanina
Leucina
Glicina
2) Quina va ser laprimera separació biològica que va rebre el nom de cromatografia?
El botànic rus Mijaíl Tswett (Mikhail Semenovich Tswett, 1872-1919) va emprar per primera vegada al 1906 la “cromatografia"...
Regístrate para leer el documento completo.