Cromatografia En Papel

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA NO. 4


“CROMATOGRAFÍA EN PAPEL”


INTRODUCCIÓN


La cromatografía se define del griego chroma, color y graphein, escribir y fue descrita en 1903 por el botánico ruso Mikhail Tswett, quien separó pigmentos de hojas de plantas mediante el uso de adsorbentes sólidos, es decir un sólido a cuya superficie se unen las sustancias. Lacromatografía incluye una serie de métodos analíticos de separación que tienen como característica general el estar constituidos de una fase estacionaria y una fase móvil, entre las que se distribuyen diferencial mente las sustancias a separar. Cuando la fase móvil, la que arrastra a las partículas que se van a separar, es un liquido (solvente o mezcla de solventes) se denomina cromatografía de líquidos. Si lafase móvil es un gas se denomina cromatografía de gases.

En cuanto la fase estacionaria, puede ser de composición variada. Si en dicha fase se utiliza un papel se denomina cromatografía en papel. La cromatografía en papel, desarrollada en 1941 por Archer Martín y Richard Synge, es una técnica en la que se en la que se aplica un pequeño volumen de la muestra cerca de uno de los extremos de unahoja de papel filtro. Este tipo de cromatografía puede ser ascendente, en la que el papel se sujeta a la parte superior de la cámara de y se sumerge en el solvente, que se encuentra en el fondo, entonces el solvente se mueve hacia arriba por capilaridad. Al realizarse la separación, los solutos de la mezcla migran a lo largo del papel con diferentes velocidades, dependiendo de su solubilidad enel solvente. Si los compuestos son coloridos se pueden ver fácilmente las manchas que dejan en el papel, en caso contrario, hay que teñirlos con algún reactivo.
La reacción de migración de alguna sustancia (Rf) puede expresarse de acuerdo con la siguiente formula:
Distancia recorrida por la muestra

Distancia recorrida por la muestra eluyente
Rf=

Cadasustancia exhibe un valor de Rf característico, en relación con un sistema disolvente dado y con el empleo de un tipo determinado de soporte.
La cromatografía en papel puede aplicarse como técnica para la separación de aminoácidos y péptidos.
Los aminoácidos proteicos son los ácidos proteicos son los ácidos carboxílicos portadores de funciones amina en el carbono alfa, como se muestra en lasiguiente figura:

R – CH - COOH

NH2

Los aminoácidos y los péptidos, entre ellos los dipéptidos como el apartame, pueden ser separados, dependiendo de su solubilidad, en solventes polares o no polares utilizando técnicas analíticas de separación como la cromatografía en papel. (1)
La cromatografía es la distribución deuna sustancia o partícula en dos fases, bien por cristalización (líquido-sólido), destilación (líquido-vapor) o sublimación (sólido-vapor).
La cromatografía en papel se basa en el reparto. La distribución de moléculas en dos fases .Estas dos fases serían:
Fase móvil: una capa de solvente orgánico que asciende por capilaridad por el papel y sobre la capa hidratada sin mezclarse con ella.
Faseestacionaria: la capa hidratada.
Ya que el movimiento se restringe al solvente orgánico, es el tiempo que permanezcan en esta fase el que determinará la distancia recorrida; a más tiempo, más distancia. Esto suele significar que el compuesto que más distancia recorre es más apolar ya que permanece más tiempo en el solvente afín.
Pueden llegar a separar sustancias con diferente K (constante dereparto), y con diferentes grupos funcionales.
Experimentalmente en ocasiones no podemos separar compuestos con diferentes grupos funcionales. (2)







RESUMEN

El objetivo de esta práctica fue descubrir la presencia de un edulcorante artificial en una muestra problema, mediante el método de cromatografía.
Cortamos e hicimos las mediciones necesarias en el papel whatman...