Cromatografia Por Adsorcion

SEPARACIÓN DE UNA MEZCLA DE AZUL DE METILENO Y FLUORESCEÍNA USANDO CROMATOGRAFÍA POR ADSORCIÓN
INTRODUCCIÓN
CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN
La característica que distingue a la cromatografía de la mayoría de los métodos físicos y químicos de separación, es que se ponen en contacto dos fases mutuamente inmiscibles. La fase estacionaria y la móvil. Una muestra que se introduce en la fase móvil estransportada a lo largo de la columna que contiene una fase estacionaria distribuida. Las especies de la muestra experimentan interacciones repetidas (repartos) entre la fase móvil y la fase estacionaria. Cuando ambas fases se han escogido en forma apropiada los componentes de la muestra se separan en bandas en la fase móvil. Al final del proceso los componentes separados emergen en orden crecientede interacción con la fase estacionaria. El componente menos retardado emerge primero, el retenido más fuertemente eluye al último. El reparto entre las fases aprovecha las diferencias entre las propiedades físicas y/o químicas de los componentes de la muestra.
En un sentido amplio, la distribución de un soluto entre dos fases es el resultado del balance de fuerzas entre las moléculas del soluto ylas moléculas de cada fase. Refleja la atracción o repulsión relativas que presentan las moléculas o iones de las fases competidoras por el soluto y entre sí. Estas fuerzas pueden ser de naturaleza polar, proviniendo de momentos dipolares permanentes o inducidos, o pueden deberse a fuerzas de dispersión del tipo London.
La fase estacionaria es un sólido en el que los componentes de la muestrason adsorbidos. La fase móvil puede ser un líquido (cromatografía líquido-sólido) o un gas (cromatografía gas-sólido); los componentes se distribuyen entre dos fases a través de la combinación de los procesos de adsorción y desorción. La cromatografía de capa fina (TLC) es un ejemplo especial de cromatografía por adsorción en la cual la fase estacionaria es un plano, en la forma de un soporte sólidoen un plato inerte.
Las separaciones efectuadas con la cromatografía de adsorción se basan en los equilibrios que rigen la distribución de las distintas especies de solutos en el disolvente y la superficie del sólido. Existen grandes diferencias en las tendencias de los compuestos a ser adsorbidos.
La naturaleza del adsorbente también influye en la determinación del orden de adsorción. Granparte de los conocimientos sobre este campo son empíricos; la

elección de adsorbente y disolvente para una separación dada con frecuencia debe hacerse sobre una base de tanteos.
La cromatografía de adsorción se ha usado principalmente para la separación de compuestos orgánicos.

OBJETIVOS
• Utilizar cromatografía por adsorción para separar la mezcla de dos colorantes

• Elaborar un perfilde elución para observar cómo fue la separación delos colorantes.

MATERIALES
1. Columna de cromatografía (15 x 2 cm)
2. Una pipeta de 1 mL (grabada en centésimas)
3. Una pipeta de 10 mL
4. Una gradilla metálica
5. Treinta tubos de ensaye de 13 x 100 mm
6. Lana de vidrio
7. Pinzas de Mohr
8. Tubería de látex
9. Dos vasos de precipitados de 100 mL
10. Soporte universal
11. Pinzaspara bureta
12. Bulbo de hule
13. Embudo de vidrio
14. Pipeta Pasteur
15. Espectrofotómetro para la región visible
16. Cubetas para el espectrofotómetro
17. Potenciómetro


MÉTODOS

RESULTADOS
1. TABLA 1. VALORES DE ABSORBANCIA OBTENIDOS PARA LA SEPARACIÓN DE FLUORESCEÍNA Y AZUL DE METILENO
Volumen de elución (mL) A493 A668
3 0.003
6 0.097
9 0.419
12 1.899
15 1.932
180.238
21 0.023
24 0.016
27 0.003
30 0.008
33 0.019
36 0.107
39 0.507
42 1.167
45 1.646
48 1.517
51 0.902
54 0.379
57 0.197
60 0.188
63 0.133
66 0.032
69 0.008
72 0.005
75 0.001

2.- PERFIL DE ELUCIÓN DE LA SEPARACIÓN DE LA MEZCLA AZUL DE METILENO-FLUORESCEÍNA



En este perfil de elución se observan claramente dos picos el primero...