Cromatografia

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER
SAN JOSE DE CUCUTA
2010

OBJETIVOS

* Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, c.c.f., sus características y los factores que en ella intervienen.

* Calcular valores de r.f. de varias sustancias y correlacionarlo a la selección adecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la polaridad delas sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.

* Aplicar la técnica de c.c.f. como criterio de pureza e identificación de sustancias.

CONCEPTO DE CROMATOGRAFÍA

La cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más compuestos por distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fase móvil.
Varios tipos de cromatografíason posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: sólido-liquido (capa fina, papel o columna), liquido-líquido y gases-liquido (fase vapor).
Todas las técnicas cromatograficas dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa enrelación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido.
Todos los sólidos finamente pulverizados tienen el poder de adsorber en mayor o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente, todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorciónselectiva es el principio fundamental de la cromatografía.

Técnica | Fase móvil | Fase estacionaria |
Cromatografía de gases | Gas | Sólido o líquido |
Cromatografía líquida
en fase inversa | Líquido (polar) | Sólido o líquido
(menos polar) |
Cromatografía líquida
en fase normal | Líquido
(menos polar) | Sólido o líquido
(polar) |
Cromatografía líquida
de intercambio iónico | Líquido(polar) | Sólido |
Cromatografía líquida
de exclusión | Líquido | Sólido |
Cromatografía líquida
de adsorción | Líquido | Sólido |
Cromatografía de
fluidos supercríticos | Líquido | Sólido |

CONCEPTO DE R.F. ( rate factor )

Rf es el registro y se define como:
Rf = distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicación / distancia que recorre el disolvente hasta el frente deleluyente.
El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra (tipo de adsorbente, eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturación, etc.). Tiene una reproducibilidad de ±20%, por lo que es mejor correr duplicados de la misma placa.

Bajo unas determinadas condiciones experimentales, un compuesto dado puede recorrer una cierta distancia alo largo de la placa. Se denomina RF a la relación existente entre la distancia recorrida por el compuesto y la recorrida por el disolvente en el mismo tiempo, es decir:
RF= (distancia recorrida por el compuesto) / (distancia recorrida por el disolvente)

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeño espesor constante alo largo de la placa. El eluyente ascenderá, por capilaridad, por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de ésta produciendo “manchas” de los componentes.
Se usan láminas de: vidrio como soporte del adsorbente, plástico (ej: acetato) ó metálicos (ej: aluminio). Los tamaños de la placa para CCf convencional son: 20 x 20; 10 x 20 y 5 x 2.
Hay placas que contienen un indicador defluorescencia, para facilitar la identificación de las muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos se requerirán técnicas de revelado.

ELUYENTES MÁS COMUNES PARA CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

-éter de petróleo
-tolueno
-dietil-éter, t-butil-éter
-diclorometano
-acetato de etilo
-n-pentano, n-hexano
-ciclohexano
-tetracloruro de carbono
-éter dietílico
-cloroformo...