Cromatografia

“CROMATOGRAFIA”
Objetivo
Aplicar y comparar los métodos cromatográficos de capa fina y columna, para separar e identificar compuestos orgánicos.
Fundamentos
La cromatografía en columna se basa principalmente en la relación entre los elementos a separar y los disolventes en fase móvil a ocupar, ya que los componentes de la mezclavan descendiendo conforme su polaridad, siendo así el primero en caer el menos polar con un disolvente no polar, hasta caer en ultimo lugar el compuesto mas polar con un disolvente polar.
Para disolver apreciablemente compuestos iónicos se necesita vencer las fuerzas electrostáticas que sostienen al retículo iónico con una cantidad considerable de energía.
Por definición, una molécula polartiene un extremo positivo y otro negativo; por tanto, hay atracción electrostática entre un ion positivo y el extremo negativo de una molécula de disolvente, y entre un ion negativo y la parte positiva de la molécula de disolvente. Estas atracciones se llaman enlaces ion-dipolo. Cada uno de estos enlaces es relativamente débil, pero en conjunto aportan suficiente energía para vencer la fuerzasinterionicas del cristal.
Para que un disolvente pueda disolver compuestos iónicos, debe tener también una constante dieléctrica elevada, o sea, debe poseer propiedades altamente aislantes para disminuir la atracción entre iones de carga opuesta.
Las características de la solubilidad de compuestos no iónicos están determinadas principalmente por su polaridad. Las sustancias no polares o débilmentepolares se disuelven en disolventes no polares o ligeramente polares; los compuestos muy polares lo hacen en disolventes de alta polaridad. “Una sustancia disuelve a otra similar”.
Desarrollo experimental
Extracción
A) Colocar la columna de cromatografía con una pinza universal o bureta en vertical totalmente seca
B) Introducir con un agitador un trozo de algodón hasta la base (paratener un goteo constante)
C) Agregar 4g de sílice de gel (actuando como fase estacionaria) con hexano : acetato de etilo 1:1 (como fase móvil)
D) Manteniendo un goteo constante en la llave de salida el hexano : acetato de etilo 1:1 se elimina de la solución y hace que se compacte la sílice de gel
E) Introducir una capa de Na2SO4 Anhidro (lumina)
F) Se deposito la mezcla decompuestos arriba de la fase estacionaria, cuidando de no salpicar las paredes, ni crear cráteres en la fase absorbente
G) Abrir la llave de salida para que la mezcla a separar penetre en el Na2SO4 Anhidro y toque la parte superior de la fase estacionaria
H) Añadir el primer disolvente de hexano – acetato de etilo 8:2
I) Abrir la llave para desarrollar la cromatografía (no dejar sindisolvente)
J) Recoger la primera fracción colorida en tubos de ensaye
K) Terminado de eluir la primera fracción se cambia el eluyente ahora por hexano y recoger la siguiente fracción en tubos de ensaye
L) Ya que todavía quedaba un color café en la parte superior se cambio el eluyente ahora por metanol : hexanol y se recogió la fracción en tubos de ensaye, hasta dejar la sílice sin ningún colorResultados
Para hacer la extracción se utilizaron la sílice de gel como rellena do la columna de cromatografía como fase estacionaria.
La sílice de gel se eligió por ser de partículas porosas, ya que son micropartículas de tamaño homogéneo con diámetro de 3 a 10 μm, se preparan por aglomeración en condiciones controladas de partículas de sílice inferiores a micrones. Las partículas se puedencubrir de materia orgánica, en este caso la mezcla a separar obtenida de la espinaca, para evitar el derrame de la columna por tener sus uniones químicas mas estables. Los grupos silanoles reactivos de la sílice son los que se adicionan a otros compuestos de con diferentes grupos funcionales, de manera que cambia el tamaño y la polaridad de la fase estacionaria.

Los...