Cromatografia

OBJETIVOS DE ESTE TRABAJO PRÁCTICO

 Conocer la técnica de cromatografía en papel y en capa fina, sus características y los
factores que en ella intervienen.
 Calcular los valores de rf devarias substancias.
 Utilizar la técnica para la separación de los pigmentos de hojas verdes.
 Emplear la técnica de cromatografía de partición en papel como criterio de
identificación de colorantes.PARTE EXPERIMENTAL

Tiempo de duración del trabajo práctico: tres horas y media

Cromatografía en Papel de una mezcla de Colorante
Se selecciona una caja de petri con su tapa, para evitar laevaporación del solvente, servirá de cámara de desarrollo. Se corta un papel de filtro circular de 11 o 6 cm de diámetro. Con un compás trazar una línea de siembra de 5mm de radio y una línea deeluyente o solvente de desarrollo de 5 cm. de radio. Hacer un orificio en el centro para pasar un pabilo de algodón que cumplirá la función de absorber el solvente de desarrollo. Ver Figura 2.El solventede desarrollo es una mezcla de: 2 partes de etanol, 1 parte de metanol y 4 partes de agua. Una vez preparado se coloca en la caja, se tapa y deja unos minutos para lograr una buena saturación. Loscolorantes a sembrar son: Rodamina B, Fluoresceína y Azul de Metileno en solución alcohólica Tiempo de desarrollo: hasta que el solvente de desarrollo alcance la línea de los 45 cm. de radio. Aprox. 20-30min.

Esta prueba no fue realizada por el equipo de trabajo. En el diagrama se muestra el artefacto utilizado (sin la tapa correspondiente, a efectos de una mejor visualización; aunque la misma esindispensable que este colocada durante el desarrollo del experimento).

Resultados:
Distancia recorrida por el solvente = 5 cm
Rodamina:
RF= 5 cm =1
5 cm

Azul de Metileno:

RF=0 cm = 0
5 cm

Fluoresceina:

RF= 3 cm = 0,6
5 cm

Cromatografía en Capa Fina

Extracción de pigmentos de hojas verdes:
Cortar en tiras finas aproximadamente 10 g de...