Cromatografia

CROMATOGRAFÍA
PRINCIPIOS Y APLICACIONES

Clara Pérez González Blanca Pinedo Martínez Belén San Román Arenas Mª del Carmen Fernández Palomar Elena Jiménez Díaz Silvia de Juanes Seligmann

ÍNDICE
Página 1. CONCEPTOS BÁSICOS DE CROMATOGRAFÍA .................................... 2. TIPOS DE CROMATOGRAFÍA ................................................................. 3. CROMATOGRAFÍA ENCOLUMNA .......................................................... 4. CROMATOGRAFÍA PLANA ...................................................................... 4.1. Cromatografía en capa fina (TLC) .................................................... 4.2. Cromatografía en capa fina de alta resolución (HPTLC) ................. 4.3. Cromatografía en papel.................................................................... 5. CROMATOGRFÍA DE ALTA RESOLUCIÓN ............................................ 5.1. Fundamentos y principios básicos ................................................... 5.2. Instrumentación ................................................................................ 5.3. Aplicaciones al análisis de alimentos ............................................... 6.CROMATOGRAFÍA DE GASES ............................................................... 6.1. Fundamentos y principios básicos ................................................... 6.2. . Componentes de un cromatógrafo de gases ................................. 6.3. Aplicaciones al análisis de alimentos ............................................... 7. BIBLIOGRAFÍA......................................................................................... 2 6 7 8 8 9 9 10 10 13 15 16 16 17 19 21

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1. CONCEPTOS BÁSICOS DE CROMATOGRAFIA
La cromatografía es una de las técnicas más efectivas para separar e identificar los componentes químicos. El método fue desarrollado por el botánico ruso Mikhail Tswett, en 1906, que utilizó una columna de carbonato cálcico para la separación de pigmentos vegetales,llegando a la conclusión de que la clorofila no era un simple compuesto químico. Las técnicas cromatográficas actuales tienen multitud de formas, la mayoría de las cuales pueden ser automatizadas y están adaptadas para el reparto de gran o pequeña cantidad de sustancias, siendo separadas y purificadas. “La separación consiste en un proceso de competición donde las moléculas tendrán que elegir enque fase residen (estacionaria, no se mueve a lo largo del proceso de separación, o móvil, líquida o gaseosa)”. Éstas diferencias a la hora de elegir son las que aprovechamos para su separación. El factor de capacidad de un soluto (K) se define como el cociente del tiempo que el soluto permanece en la fase estacionaria y el que permanece en la fase móvil. En condiciones isocráticas equivale a larelación de moléculas que en un instante de tiempo se encuentran en fase móvil y en fase estacionaria. Es una medida de la retención de los compuestos, siendo función de; • La composición del relleno de la columna • La polaridad de la fase móvil Concentración en fase A −−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−− = Kd Concentración en fase B Un cromatograma es la respuesta captada por un detector en función del tiempode elución o volumen. Consiste en una serie de picos que representan la elución de los analitos individuales. El tiempo de retención tR para cada analito tiene dos componentes. El primero es el tiempo que tarda la molécula de analito en pasar a través de los espacios libres entre la matriz de la fase estacionaria. Este aspecto se refiere al volumen de la columna vacía, V0, y el tiempo que tarde enpasar a través de ella, tM. El valor de tM debe ser el mismo para todos a los analitos y puede ser medido usando un soluto que no interaccione con la fase estacionaria y que simplemente gaste su tiempo de elución en que la fase móvil recorra todo el volumen vacío. El segundo componente es el tiempo en el que el analito es retenido por la fase estacionaria, t´R. Este tiempo es característico de...