cromatografia

CROMATOGRAFIA EN COLUMNA, EN CAPA FINA Y SOBRE PAPEL

OBJETIVOS:

• Conocer las técnicas que nos permiten separar e identificar una mezcla de sustancias.
• Conocer los tres tipos básicos de cromatografía.
• Reconocer lo que significa una fase fija y una fase móvil, así como lo que involucran cada una de ellas.
• Poder diferenciar y utilizar cada una de estas técnicas en el momentoadecuado.


INTRODUCCIÓN:

La cromatografía es un conjunto de técnicas que nos permiten analizar, separar o purificar una sustancia.
La cromatografía se basa en la diferente velocidad con que se desplazan los componentes de una mezcla que se encuentran en dos fases en mucho contacto: fase fija(o también llamada fase estacionaria) y fase móvil (también llamada fase eluyente o solvente).
En laseparación cromatografica la fase fija y la fase móvil interaccionan entre si y constituyen un SISTEMA CROMATOGRAFICO.
Según el fenómeno físico predominante y el estado físico de las fases involucradas existen 3 tipos de cromatografía: de absorción, de partición y de intercambio de iones.
La cromatografía en capa fina es una adaptación muy usada de la cromatografía en columna, ya que permite el usode absorbentes eficientes, los que se aplican formando una capa delgada que se adhiere sobre la superficie de una lamina (porta objeto), lo que finalmente se coloca verticalmente; mientras que la cromatografía sobre papel es un tipo de cromatografía de partición que utiliza el papel como soporte , esta separaciones se realizan por la partición continua de las sustancias entre la fase fija y lafase móvil.


I. FUNDAMENTO TEÓRICO

Cromatografía en capa fina:
La cromatografía en capa fina, o más comúnmente TLC (thin layer chromatography, en inglés), es una técnica cromatografica utilizada, para separar los componentes puros que forman parte de una mezcla.
Esta separación se consigue mediante la diferencia entre las fuerzas de adhesión de las moléculas de los componentes a una fasemóvil (normalmente, un disolvente) y a una fase estacionaria (la llamada capa fina, que puede ser papel o gel de sílice). Esta diferencia se traduce en un mayor o menor desplazamiento o movilidad de cada componente individual, lo cual permite su separación e identificación.
Cromatografía sobre el papel:
La cromatografía sobre papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizaranálisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica muy potente no requiere de ningún tipo de equipamiento.
La separaciones se realizan por la partición continua de las sustancias entre la fase estacionaria y la fase móvil. La fase estacionaria esta constituida simplemente por una tira de papel.
La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas gotas de la solución y evaporando el solvente.Luego el disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad , luego se coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra del lado de abajo dentro de un recipiente que contiene fase móvil en el fondo.
Después de unos minutos cuando el solvente deja de ascender o ha llegado al extremo se retira el papel y seca. Si el solvente elegido fue adecuado y las sustancias tienencolor propio se verán las manchas de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado.
Hay varios factores de los cuales depende una cromatografía eficaz: la elección del solvente y la del papel de filtro.
Relación de frente o Rf:
La constante RF es una constante usada especialmente en la cromatografía sobre papel y en capa fina(explicados anteriormente) estos métodos pueden servir para la identificación de un compuesto ya que el desplazamiento de una sustancia respecto al desplazamiento del disolvente es CONSTANTE.
Se define como:



La distancia recorrida por el compuesto se mide generalmente desde el centro de la mancha. Para que los RF sean reproducibles deben ser fijadas en una serie de condiciones (Espesor...