Cromatografia

CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA

OBJETIVOS
* Conocer la técnica TLC de separación e identificación de compuestos.
* Calcular la RF de la aliína, sulfoxido que se encuentra naturalmente en el ajo fresco, derivado del aminoácido cisteína.
* Identificar un compuesto usando la técnica TLC.

MARCO TEORICO
La cromatografía es un método de separación y caracterización de sustanciaspresentes en mezclas, la cual se basa en el principio de retención selectiva. Existen diversos métodos de cromatografía entre los cuales encontramos la cromatografía de capa fina.
La cromatografía de capa fina es un proceso mediante el cual se pretende separar o identificar los componentes de una muestra, para esto se usa una capa delgada de adsorbente sobre una placa, para de esta forma, una vezdepositada una muestra en la parte inferior de la placa, hacer que las sustancias asciendan gracias a un disolvente.
Dicha placa debe ser introducida en una celda de cromatografía, la cual contiene un disolvente a una altura menor a la que se encuentra la muestra. De esta forma se tiene que el disolvente asciende por acción de la capilaridad, arrastrando a las sustancias a diferentes velocidadesdependiendo del grado de adsorción.
Posteriormente, cuando la cubeta es secada, es posible observar diferentes compuestos de forma directa o indirecta si estos se colorean o no gracias a rayos de luz ultravioleta.
El ascenso de las sustancias a través de la placa se debe a la atracción de las fuerzas electrostáticas originadas sobre la superficie del adsorbente y el disolvente, estableciendo diferentesvelocidades de ascenso dependiendo del tipo de disolvente y las propiedades del compuesto.
Así mismo, la polaridad juega un papel importante en este proceso, estableciendo una relación directamente proporcional entre esta y la atracción por el adsorbente.
La polaridad del disolvente también desempeña un papel determinante, pues influye en la velocidad con la que asciende el soluto, teniendo deesta forma que a mayor polaridad, mayor grado de ascensión del soluto, manteniendo la relación directamente proporcional enunciada anteriormente.
Otro factor fundamental a tener en cuenta es la actividad del adsorbente, pues tiene una relación directamente proporcional con el grado de emigración del soluto. Por esto los adsorbentes mas usados son el silca gel y alúmina activada entre otros.Existe una relación entre la distancia recorrida por el compuesto y por el disolvente en determinado intervalo de tiempo, conocida como RF, la cual varia dependiendo de las propiedades del disolvente y del compuesto. Esta relación se calcula bajo la siguiente ecuación:
RF=distancia recorrida por el compuestodistancia recorrda por el dislvente

La distancia recorrida por el compuesto se debe medirdesde donde se coloco inicialmente en la placa, es decir, desde el centro de la mancha.

RESULTADOS
h disolvente
Sustancias
h muestra 4
Muestra 2
Muestra 3
Muestra 4
Muestra 1
Disolvente

Cabe aclarar que apenas se retira la placa del disolvente después de media hora, no se pueden apreciar las distancias recorridas por las muestras, por lo cual se agrego reactivo de nidrina para luegollevarla al horno y que el color de estas líneas se revelara obteniendo lo que se muestra en la imagen anterior donde podemos obtener las alturas midiendo las distancias de los puntos de siembra a el final de la línea del analito y la línea del disolvente, lo cual ocurre luego de silica gel del horno, en el caso de la primera muestra podemos decir que esta se sembro en mucha cantidad por locual tomo esa forma distinata a las otras muestra, en el cuadro que se muestra a continuación se ubican las alturas obtenidas para cada muestra que sembrada a 1 cm de distancia entre sí y para el disolvente:
Tabla N°1 Alturas obtenidas.
Altura Disolvente (cm) | Altura Muestras (cm) |
4,5 | 2,8 |
| 2,7 |
| 2,7 |
| 2,6 |

Cabe aclarar que estas distancias se miden a 1 cm de la base...