cromatografia

Cromatografía

Objetivo: conocer los fundamentos y la aplicación de la técnica de cromatografía


Conceptos previos
Cromatografía: La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar losdistintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.
La cromatografía puede cumplir dosfunciones básicas que no se excluyen mutuamente:
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.

La cromatografía en capa fina: es una técnica cromatográfica. La faseestacionaria es una capa uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte.
En cromatografía en capa fina se utiliza una placa cromatográfica inmersa verticalmente en un eluyente apolar; La placa cromatográfica consiste en una fase estacionaria polar (comúnmente se utiliza sílica gel) adherida a una superficie solida con algún agentecementante. El eluyente debe ser un compuesto liquido apolar, generalmente orgánico. Para realizar la CCF, se debe apoyar la placa cromatografica sobre algún recipiente o camara que contenga la fase líquida a aproximadamente 1 cm (la distancia entre el principio de la placa y la muestra que se desea analizar). la cromatografía en capa fina es la combinación de todos los colores en un papel.


Tipos decromatografía:
Tipos
Fase móvil
Fase estacionaria
Cromatografía en papel
Líquido
Liquido (moleculas de agua contenidas en la celulosa del
Papel)
Cromatografía en capa fina
Líquido
Solido
Cromatografía de gases
Gas
Solido o Liquido
Cromatografía líquida
en fase inversa
Líquido (polar)
Solido o liquido (menos polar)
Cromatografía líquida
en fase normal
Líquido
(menos polar)Solido o liquido (polar)
Cromatografía líquida
de intercambio iónico
Líquido (polar)
Solido
Cromatografía líquida
de exclusión
Líquido
Solido
Cromatografía líquida
de absorción
Líquido
Solido
Cromatografía de
fluidos supercríticos
Líquido
Solido
Las distintas técnicas cromatográficas1 se pueden dividir según cómo esté dispuesta la fase estacionaria:
Cromatografía plana. La faseestacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas son:
Cromatografía en papel
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en columna. La fase estacionaria se sitúa dentro de una columna. Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:
Cromatografía de líquidos
Cromatografía de gases
Cromatografía de fluidos supercríticos
La cromatografía de gasesincluye a numerosos compuestos orgánicos. En el caso de compuestos no volátiles se recurre a procesos denominados de "derivación", a fin de convertirlos en otros compuestos que se volatilicen en las condiciones de análisis.
Dentro de la cromatografía líquida destaca la cromatografía líquida de alta resolución, que es la técnica cromatográfica más empleada en la actualidad, normalmente en su modalidadde fase reversa, en la que la fase estacionaria tiene carácter no polar, y la fase móvil posee carácter polar (generalmente agua o mezclas con elevada proporción de la misma, o de otros disolvente polares, como por ejemplo metanol). El nombre de "reversa" viene dado porque tradicionalmente la fase estacionaria estaba compuesta de sílice o alúmina, de carácter polar, y por tanto la fase móvil era...