cromatografia

Año: 2012

Titulo
La cromatografia en papel aplicada a la separacion de pigmentos de tejidos vegetales.Introducción

La cromatografía es el nombre que se le da a un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, identificar y cuantificar dichos componentes. Tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Esta técnica es muy efectiva y se la usa tanto en investigación como a en la industrial.
Todos lossistemas de cromatografía contienen una fase móvil y una fase estacionaria; fase móvil que consiste en un fluido (gas o líquido) que arrastra la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando.
La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que nose excluyen mutuamente: Separar los componentes de la mezcla (analítica) y cuantificar los componentes de la mezcla (preparativa).
Hay diversos métodos de cromatografías para separar pigmentos:
papel
capa fina
líquidos
gases
fluidos supercríticos.
Se eligió la cromatografía de papel que consiste en: un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar análisis cualitativos es unatécnica muy sencilla y no requiere de materiales especiales. La fase estacionaria está constituida simplemente por el papel de filtro. Se deposita en un mortero el tejido vegetal con una pequeña cantidad de solvente, se tritura, y se colocan pequeñas gotas de la muestra previamente filtrada, sobre una línea perpendicular en el papel de filtro (siembra) y se lo coloca en un vaso de precipitaciónque contiene el disolvente elegido dejando correr por capilaridad el disolvente utilizado.
Después de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al extremo se retira el papel y se seca. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se verán manchas de distinto color separadas.
Hay varios factores en la cromatografía: la elección del disolvente yla del papel de filtro.
El propósito de este experimento es extraer y diferenciar los diferentes pigmentos (clorofila A y B, carotenoides y xantofilas) de los tejidos vegetales: acelga (Beta), lechuga de roble (chicorium intybus) ubicados en los cloroplastos de las células de estas tejidos.

Hipótesis
Los cloroplastos de los diferentes tejidos vegetales poseen una mezcla de pigmentos condiferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenoides (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.

Objetivo general:
Extraer los pigmentos fotosintéticos y separarlos mediante una técnica sencilla de cromatografía en papel.
Objetivos específicos:

Aplicar la cromatografía como una técnica de separación de componentes de tejidosvegetales.
Determinar los solventes apropiados para la extracción de los pigmentos.
Identificar los eluyentes apropiados para la separación cromatografía.



Metodología


Materiales

Papel Filtro
capilares
hojas de acelga y lechuga de roble
Solvente (alcohol)
Mortero
Embudo
Matraz
Vaso de precipitado
Pipetas
Disolventes (acetona, metanol, cloroformo, éter de petróleo,...